[صفحه اصلی ]   [Archive] [ English ]  
:: درباره نشريه :: آخرين شماره :: تمام شماره‌ها :: جستجو :: ثبت نام :: ارسال مقاله :: تماس با ما ::
بخش‌های اصلی
صفحه اول سایت مجله::
صفحه اول سایت دانشگاه::
اطلاعات مجله::
اعضای دفتر مجله::
نمایه‌های مجله::
آرشیو مقالات::
راهنمای نویسندگان::
راهنمای داوران::
ثبت نام و ارسال مقاله::
امکانات سایت مجله::
واحد علم سنجی دانشگاه::
مقالات مرتبط::
::
جستجو در پایگاه

جستجوی پیشرفته
..
دریافت اطلاعات پایگاه
نشانی پست الکترونیک خود را برای دریافت اطلاعات و اخبار پایگاه، در کادر زیر وارد کنید.
..
نظرسنجی
نظر شما در مورد مقالات مجله علمی دانشگاه علوم پزشکی کردستان چیست؟
ضعیف
متوسط
خوب
عالی
   
..
شاخص های استنادی مجله

Citation Indices from GS

AllSince 2019
Citations91105513
h-index3825
i10-index238140

 
..
کتابخانه مرکزی دانشگاه علوم پزشکی کردستان
AWT IMAGE
..
معاونت تحقیقات و فن آوری
AWT IMAGE
..
SCImago Journal & Country Rank
:: دوره 28، شماره 2 - ( مجله علمی دانشگاه علوم پزشکی کردستان 1402 ) ::
جلد 28 شماره 2 صفحات 27-12 برگشت به فهرست نسخه ها
بیان دو سیسترونی و پایدار فاکتور 9 انعقادی انسانی و پروتئین فلورسنت سبز تقویت شده در سلول‌های تخمدان همستر چینی سازگار با کشت معلق
فهیمه قاسمی1 ، فاطمه نیکومنش2 ، علیرضا زمردی پور 3
1- استادیار، مرکز تحقیقات سلولی و مولکولی، دانشگاه علوم پزشکی بیرجند، بیرجند، ایران.
2- استادیار، مرکز تحقیقات بیماری‌های عفونی، دانشگاه علوم پزشکی بیرجند، بیرجند، ایران
3- استاد، گروه پزشکی مولکولی، پژوهشکده بیوتکنولوژی پزشکی، پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری، تهران، ایران ، zomorodi@nigeb.ac.ir
چکیده:   (829 مشاهده)
زمینه و هدف: درمان فعلی هموفیلی B درمان جایگزینی است که شامل تزریق داخل وریدی فاکتور 9 انسانی خالص شده از پلاسما یا فرم نوترکیب تولید شده در سلول‌های پستانداران است. در تحقیق حاضر با استفاده از یک سیستم بیانی دو سیسترونی، بیان پایدار فاکتور 9 انسانی در ردۀ سلولی تخمدان همستر چینی سازگار با کشت معلق (CHO-s) و محیط عاری از سرم مورد بررسی قرار گرفت.
مواد و روش ها: یک قطعه DNA متشکل از توالی های نوکلئوتیدی فاکتور 9 انسانی، جایگاه میانی ورود ریبوزوم و پروتئین فلورسنت سبز تقویت شده در وکتور بیانی pcDNA3.1 تحت کنترل پروموتر سایتومگالو ویروس همسانه سازی شد. پلاسمید دوسیسترونی حاصل با استفاده از آنزیم برشگر BglII خطی و در سلول‌های CHO-s ترانسفکت شد. سلول‌های ترنسفکت شده به مدت 14 روز تحت تیمار با ماده جنتیسین قرار گرفتند. سپس محیط کشت سلول‌های پایدار جمع‌آوری و بیان فاکتور 9 با استفاده از وسترن بلاتینگ و الایزا بررسی شد. فعالیت انعقادی نیز با روش کروموژنیک مورد ارزیابی قرار گرفت.
یافته ها: سلول های 
CHO-s نوترکیب و مقاوم به جنتیسین، زیر میکروسکوپ فلورسنت به رنگ سبز مشاهده شدند که حاکی از بیان و تجمع پروتئین فلورسنت سبز تقویت شده در سیتوپلاسم سلول‌ها بود. نتایج حاصل از وسترن بلاتینگ، بیان و ترشح فاکتور 9 نوترکیب به داخل محیط کشت را تائید کرد. مقدار فاکتور 9 ترشح شده ng/mL/106 150 و فعالیت انعقادی آن mU/mL 0/2 ± 5/6 محاسبه شد.
نتیجه‌گیری: یافته های ما نشان داد که این سیستم بیانی دو سیسترونی توانایی تولید هم‌زمان پروتئین فلورسنت سبز تقویت شده و فاکتور 9 انسانی را در سلول‌های CHO-s دارد. این سامانه بیانی، فرایند انتخاب و جداسازی سلول‌های بیان کننده فاکتور 9 را تسهیل می‌کند
واژه‌های کلیدی: فاکتور 9 انعقادی انسانی، سلول تخمدان همستر چینی، پروتئین فلورسنت سبز تقویت شده، بیان دوسیسترونی.
متن کامل [PDF 886 kb]   (215 دریافت)    
نوع مطالعه: پژوهشي اصیل | موضوع مقاله: بیوتکنولوژی
دریافت: 1399/7/10 | پذیرش: 1400/10/7 | انتشار: 1402/3/7
فهرست منابع
1. Giangrande P. Haemophilia B: christmas disease.Expert Opin Pharmacother. 2005;6(9):1517-24. [DOI:10.1517/14656566.6.9.1517] [PMID]
2. Camerino G, Grzeschik KH, Jaye M, De La Salle H, Tolstoshev P, Lecocq JP,et al. Regional localization on the human X chromosome and polymorphism of the coagulation factor IX gene (Hemophilia B locus). Proc Natl Acad Sci USA. 1984;81(2):498-502. [DOI:10.1073/pnas.81.2.498] [PMID] []
3. Ghasemi F, Zomorodipour A, Karkhane AA, Khorramizadeh MR. In silico designing of hyper-glycosylated analogs for the human coagulation factor IX. J Mol Graph Model.2016;68:39-47. [DOI:10.1016/j.jmgm.2016.05.011] [PMID]
4. Chia J, Louber J, Glauser I, Taylor S, Bass GT, Dower SK, et al.Half-life-extended recombinant coagulation factor IX-albumin fusion protein is recycled via the FcRn-mediated pathway. J Biol Chem. 2018;293(17):6363-73. [DOI:10.1074/jbc.M117.817064] [PMID] []
5. Franchini M, Frattini F, Crestani S, Sissa C, Bonfanti C.. Treatment of hemophilia B: focus on recombinant factor IX. Biologics. 2013;7:33-38. [DOI:10.2147/BTT.S31582] [PMID] []
6. Kundu RK, Sangiorgi F, Wu LY, Kurachi K, Anderson WF, Maxson R, et al. Targeted inactivation of the coagulation factor IX gene causes hemophilia B in mice. Blood. 1998;92(1):168-74. [DOI:10.1182/blood.V92.1.168.413k06_168_174] [PMID]
7. Franchini Mannucci PM. Past, present and future of hemophilia: a narrative review. Orphanet J Rare Dis. 2012;7(1):1-8. [DOI:10.1186/1750-1172-7-24] [PMID] []
8. Santagostino E, Negrier C, Klamroth R, Tiede A, Pabinger-Fasching I, Voigt C,et al.Safety and pharmacokinetics of a novel recombinant fusion protein linking coagulation factor IX with albumin (rIX-FP) in hemophilia B patients. Blood. 2012;120(12):2405-11. [DOI:10.1182/blood-2012-05-429688] [PMID] []
9. Sankar AD, Weyand AC, Pipe SW. The evolution of recombinant factor replacement for hemophilia. Transfusion and Apheresis Science. Transfus Apher Sci. 2019;58(5):596-600. [DOI:10.1016/j.transci.2019.08.010] [PMID]
10. Jayandharan GR, Srivastava A. Hemophilia: genetics, diagnosis and treatment.J Genet Syndr Gene Ther. 2011;1:1-12. [DOI:10.4172/2157-7412.S1-005]
11. White II GC, Beebe A, Nielsen B. Recombinant factor IX. Thromb Haemost. 1997;78(1):261-5. [DOI:10.1055/s-0038-1657536]
12. Zacchi LF, Roche-Recinos D, Pegg CL, Phung TK, Napoli M, Aitken C,et al.Coagulation factor IX analysis in bioreactor cell culture supernatant predicts quality of the purified product. Communications Biology. 2021;4(1):1-19. [DOI:10.1038/s42003-021-01903-x] [PMID] []
13. Windyga J, Solano Trujillo MH, Hafeman AE. BAX326 (RIXUBIS): a novel recombinant factor IX for the control and prevention of bleeding episodes in adults and children with hemophilia B.Ther Adv Hematol. 2014;5(5):168-80. [DOI:10.1177/2040620714550573] [PMID] []
14. Pegg CL, Zacchi LF, Recinos DR, Howard CB, Schulz BL. Identification of novel glycosylation events on human serum-derived Factor IX. Glycoconjugate Journal. 2020;37(4):471-83. [DOI:10.1007/s10719-020-09922-2] [PMID]
15. Zhong D, Smith KJ, Birktoft JJ, Bajaj SP. First epidermal growth factor-like domain of human blood coagulation factor IX is required for its activation by factor VIIa/tissue factor but not by factor XIa. Proc Natil Acad Sci. 1994;91(9):3574-8. [DOI:10.1073/pnas.91.9.3574] [PMID] []
16. Ghasemi F, Khorramizadeh MR, Karkhane AA, Zomorodipour A. Studying the Expression Efficiencies of Human Clotting Factor IX Analogs, Rationally Designed for Hyper-glycosylation. Iran J Pharm Res. 2021;20(2):523-535.
17. Nielsen FS, Schmidt AS, Kristensen AK, Nielsen AD, Kristensen BK, Palm L. Characterisation of recombinant factor IX before and after GlycoPEGylation. Int J Pharm. 2020;588:119654. [DOI:10.1016/j.ijpharm.2020.119654] [PMID]
18. Samis JA, Ramsey GD, Walker JB, Nesheim ME, Giles AR. Proteolytic processing of human coagulation factor IX by plasmin. Blood. 2000;95(3):943-51. [DOI:10.1182/blood.V95.3.943.003k34_943_951] [PMID]
19. Tuddenham EG, Cooper DN. The molecular genetics of haemostasis and its inherited disorders Oxford University Press, USA; 1994.
20. Kim JY, Kim YG, Lee GM, CHO cells in biotechnology for production of recombinant proteins: current state and further potential. Appl Microbiol Biotechnol. 2012; 93(3):917-30. [DOI:10.1007/s00253-011-3758-5] [PMID]
21. Croset A, Delafosse L, Gaudry J-P, Arod C, Glez L, Losberger C,et al.Differences in the glycosylation of recombinant proteins expressed in HEK and CHO cells. J Biotechnol. 2012;161(3):336-48. [DOI:10.1016/j.jbiotec.2012.06.038] [PMID]
22. Gurtu V, Yan G, ZhangG. IRES bicistronic expression vectors for efficient creation of stable mammalian cell lines. Biochem Biophys Res Commun. 1996;229(1):295-8. [DOI:10.1006/bbrc.1996.1795] [PMID]
23. Khorshidi S, Zomorodipour A, Behmanesh M, Vatandoost J, Bos MH. Functional expression of the human coagulation factor IX using heterologous signal peptide and propeptide sequences inmammalian cell line. Biotechnol lett. 2012;37(10):1773-1781. [DOI:10.1007/s10529-015-1868-3] [PMID]
ارسال پیام به نویسنده مسئول

ارسال نظر درباره این مقاله
نام کاربری یا پست الکترونیک شما:

CAPTCHA



XML   English Abstract   Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Ghasemi F, Nikumanesh F, Zomorodipour A. Bicistronic and Stable Expression of Human Coagulation Factor IX and Enhanced Green Fluorescent Protein in Suspension-Adapted Chinese Hamster Ovary Cells. SJKU 2023; 28 (2) :12-27
URL: http://sjku.muk.ac.ir/article-1-6344-fa.html

قاسمی فهیمه، نیکومنش فاطمه، زمردی پور علیرضا. بیان دو سیسترونی و پایدار فاکتور 9 انعقادی انسانی و پروتئین فلورسنت سبز تقویت شده در سلول‌های تخمدان همستر چینی سازگار با کشت معلق. مجله علمي دانشگاه علوم پزشكي كردستان. 1402; 28 (2) :12-27

URL: http://sjku.muk.ac.ir/article-1-6344-fa.html



بازنشر اطلاعات
Creative Commons License این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است.
دوره 28، شماره 2 - ( مجله علمی دانشگاه علوم پزشکی کردستان 1402 ) برگشت به فهرست نسخه ها
مجله علمی دانشگاه علوم پزشکی کردستان Scientific Journal of Kurdistan University of Medical Sciences
مجله علمی دانشگاه علوم پزشکی کردستان Scientific Journal of Kurdistan University of Medical Sciences
Persian site map - English site map - Created in 0.06 seconds with 46 queries by YEKTAWEB 4645