|
توسعه یک مدل آزمایشگاهی آلودگی پشه آنوفل استفنسی به پلاسمودیوم برگئی و شناسایی مولکولی اسپوروزوئیت ها با استفاده از qPCR
|
زینب محمدی فیروز1    ، زهرا سادات موسوی شفیع1 ، فلورا فروزش2 ، اکرم ابوئی مهریزی3 ، جعفر جوربندی ثانی3 ، هیمن یوسفی3 ، سکینه پیراحمدی4 |
1- گروه ژنتیک، دانشگاه علوم پزشکی آزاد تهران، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران، بخش تحقیقات مالاریا و ناقلین، مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران
2- گروه ژنتیک، دانشگاه علوم پزشکی آزاد تهران، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران
3- بخش تحقیقات مالاریا و ناقلین، مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران
4- بخش تحقیقات مالاریا و ناقلین، مرکز تحقیقات بیوتکنولوژی، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران ، s.pirahmadi2020@googlemail.com |
|
|
چکیده: (408 مشاهده) |
زمینه و هدف: مالاریا نوعی بیماری عفونی شایع است که براثر ابتلا به پاتوژنی به نام پلاسمودیوم ایجاد میشود که با گزش پشه آنوفل ماده به میزبان مهرهدار منتقل میشود. هدف این مطالعه توسعه مدل آزمایشگاهی پلاسمودیوم برگئی-موش بالب سی-آنوفل استفنسی با تأکید بر کاربرد روش حساس qPCR برای تشخیص عفونت اسپوروزوئیتهای پلاسمودیوم برگئی در آنوفل استفنسی است.
مواد و روشها: موش بالب سی ماده آلوده به پلاسمودیوم برگئی برای خونخواری پشه های آنوفل استفنسی استفاده شد. سپس، پشهها بهمدت 24 روز در دمای 19 تا 21 درجه سانتیگراد و رطوبت 60 تا 80 درصد نگهداری شدند. بهمنظور بررسی حضور اسپوروزوئیتها، غدد بزاقی پشهها با میکروسکوپ نوری بررسی شدند. بهمنظور تأیید آلودگی، تست qPCR با تکثیر اختصاصی ژن cytochrome b (cytb) انگل پلاسمودیوم برگئی انجام شد. در نهایت، برای بررسی قابلیت اسپوروزوئیتها در آلودگی میزبان بعدی، در روز 21 بعد از خونخواری پشههای آلوده برای خونخواری موش بالب سی استفاده شدند.
یافتهها: در بررسی آلودگی غدد بزاقی پشههای بررسیشده با روش qPCR، اسپوروزوئیتها در تمامی پشهها موجود بودند که میانگین عدد Cq در تست qPCR (33/84±2/18) بود. نتایج آنالیز منحنی استاندارد روی نمونه کنترل مثبت عدد R2 برابر با 98/0 و شیب خط برابر با 38/3- را نشان داد و Cq حد تشخیص 34 به دست آمد. بهعلاوه، نتایج بررسی اسمیر موشها در روز 5 بعد از خونخواری نشان داد تمامی موشهایی که برای گزش پشههای آلوده استفاده شدند، به انگل پلاسمودیوم برگئی آلوده بودند (قابلیت آلودگی 100 درصد اسپوروزوئیتها).
نتیجهگیری: در این مطالعه برای تأیید آلودگی اسپوروزوئیتی در پشههای گروه آزمون از روش مولکولی qPCR با تکثیر ژن cytb انگل پلاسمودیوم برگئی استفاده شد که در مقایسه با روش میکروسکوپی، حساسیت بیشتری نشان داد. نتایج تست qPCR نشاندهنده میزان زیاد آلودگی اسپوروزوئیتی در پشهها بود. از مدل آزمایشگاهی ارائهشده در این مطالعه میتوان در تحقیقات بعدی برای ارزیابی استراتژیهای مسدودکننده انتقال یا بررسی برهمکنش انگل-پشه آنوفل استفاده کرد. |
|
| واژههای کلیدی: آنوفل استفنسی، اسپوروزوئیت، پلاسمودیوم برگئی، تست qPCR، مالاریا |
|
|
متن کامل [PDF 858 kb]
(49 دریافت)
|
نوع مطالعه: پژوهشي اصیل |
موضوع مقاله:
انگل شناسی و قارچ شناسی
دریافت: 1403/12/4 | پذیرش: 1405/4/27 | انتشار: 1405/6/17
|
|
|
|
|
|
|
| ارسال پیام به نویسنده مسئول |
|
|
|
| ارسال نظر درباره این مقاله |
|
|
|
