[صفحه اصلی ]   [Archive] [ English ]  
:: درباره نشريه :: آخرين شماره :: تمام شماره‌ها :: جستجو :: ثبت نام :: ارسال مقاله :: تماس با ما ::
بخش‌های اصلی
صفحه اول سایت مجله::
صفحه اول سایت دانشگاه::
اطلاعات مجله::
اعضای دفتر مجله::
نمایه‌های مجله::
آرشیو مقالات::
راهنمای نویسندگان::
راهنمای داوران::
ثبت نام و ارسال مقاله::
امکانات سایت مجله::
واحد علم سنجی دانشگاه::
مقالات مرتبط::
::
جستجو در پایگاه

جستجوی پیشرفته
..
دریافت اطلاعات پایگاه
نشانی پست الکترونیک خود را برای دریافت اطلاعات و اخبار پایگاه، در کادر زیر وارد کنید.
..
نظرسنجی
نظر شما در مورد مقالات مجله علمی دانشگاه علوم پزشکی کردستان چیست؟
ضعیف
متوسط
خوب
عالی
   
..
شاخص های استنادی مجله

Citation Indices from GS

AllSince 2019
Citations97986109
h-index3927
i10-index253158

 
..
کتابخانه مرکزی دانشگاه علوم پزشکی کردستان
AWT IMAGE
..
معاونت تحقیقات و فن آوری
AWT IMAGE
..
SCImago Journal & Country Rank
:: دوره 27، شماره 6 - ( مجله علمی دانشگاه علوم پزشکی کردستان 1401 ) ::
جلد 27 شماره 6 صفحات 24-13 برگشت به فهرست نسخه ها
نقش سرین 310 در فعالیت آنزیمی و پروفایل دمایی کاسپاز-9 انسانی
راحله شاکری 1، محدثه محمودیان2 ، رضا خدارحمی3 ، سهیلا محمدی4
1- استادیار، گروه علوم زیستی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه کردستان، سنندج، ایران ، r.shakeri@uok.ac.ir
2- دانشجوی کارشناسی ارشد، گروه علوم زیستی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه کردستان، سنندج، ایران
3- استاد، مرکز تحقیقات بیولوژی پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی کرمانشاه، کرمانشاه، ایران
4- استادیار، مرکز تحقیقات علوم دارویی، دانشگاه علوم پزشکی کرمانشاه، کرمانشاه، ایران
چکیده:   (1391 مشاهده)
زمینه و هدف: کاسپاز-9 یک آنزیم کلیدی در مسیر داخلی آپوپتوز است که فعالیت آن با سازوکارهای مختلفی مانند فسفریلاسیون تنظیم می­شود. گزارش شده است که فسفریلاسیون سرین 310 در کاسپاز-9 موشی مانع پردازش آنزیم می­شود. نقش این باقیمانده ­ی آمینواسیدی در فعالیت آنزیمی کاسپاز-9 انسانی نامشخص است. در این پژوهش اثر ایجاد بار منفی روی سرین 310 در فعالیت آنزیمی کاسپاز-9 انسانی مورد بررسی قرار گرفت.
مواد و روش ها:
 با توجه به اینکه فسفریلاسیون منجر به ایجاد بار منفی در کاسپاز-9 می­شود، کدون سرین 310 در کاسپاز-9 انسانی به کدون آسپارتات با استفاده از روش جهش ­زایی هدفمند Quick change جهش داده شد. کاسپاز-9 نوترکیب وحشی و جهش­ یافته در سویه باکتری BL21(DE3) بیان و با استفاده از کروماتوگرافی گرایشی تخلیص شدند. پروفایل دمایی و فعالیت کاسپاز-9 جهش­ یافته در مقایسه با آنزیم وحشی به کمک سوبسترای کروموژنیک Ac-LEHD-pNA در شرایط برون­ تنی سنجش شد. تجزیه و تحلیل آماری داده­ ها با آزمون t انجام شد.
 یافته‌ها: نتایج نشان داد که پارامترهای سینتیکی کاسپاز-9 جهش­ یافته ­ی S310D و آنزیم وحشی مشابه هستند؛ اما پروفایل دمایی آن‌ها متفاوت است. آنزیم جهش ­یافته­ ی S310D در دمای 37 درجه­ ی سانتی­گراد فعالیت بیشتر و در دماهای 4، 15، 45 و 60 درجه­ ی سانتی­گراد فعالیت کمتری در مقایسه با آنزیم وحشی داشت.
نتیجه‌گیری: ایجاد بار منفی بر روی سرین 310 در کاسپاز-9 بدون تأثیر بر پارامترهای سینتیکی سبب تغییر در پروفایل دمایی آنزیم
می­شود.

 
واژه‌های کلیدی: کاسپاز، سنجش آنزیمی، آپوپتوز، جهش‌زایی
متن کامل [PDF 1084 kb]   (408 دریافت)    
نوع مطالعه: پژوهشي اصیل | موضوع مقاله: بیوتکنولوژی
دریافت: 1400/10/26 | پذیرش: 1401/3/25 | انتشار: 1401/12/12
فهرست منابع
1. Kerr JF, Wyllie AH, Currie AR. Apoptosis: a basic biological phenomenon with wideranging implications in tissue kinetics. Br J Cancer. 1972;26(4):239-57.
2. McIlwain DR, Berger T, Mak TW. Caspase functions in cell death and disease. Cold Spring Harb Perspect Biol. 2013;5(4):a008656.
3. Shakeri R, Kheirollahi A, Davoodi J. Apaf-1: Regulation and function in cell death. Biochimie. 2017;135:111-25.
4. Cardone MH, Roy N, Stennicke HR, Salvesen GS, Franke TF, Stanbridge E, et al. Regulation of cell death protease caspase-9 by phosphorylation. Science. 1998;282(5392):1318-21.
5. Allan LA, Morrice N, Brady S, Magee G, Pathak S, Clarke PR. Inhibition of caspase-9 through phosphorylation at Thr 125 by ERK MAPK. Nat Cell Biol. 2003;5(7):647-54.
6. Martin MC, Allan LA, Lickrish M, Sampson C, Morrice N, Clarke PR. Protein kinase A regulates caspase-9 activation by Apaf-1 downstream of cytochrome c. J Biol Chem. 2005;280(15):15449-55.
7. Dai J, Jin W-H, Sheng Q-H, Shieh C-H, Wu J-R, Zeng R. Protein phosphorylation and expression profiling by Yin-yang multidimensional liquid chromatography (Yin-yang MDLC) mass spectrometry. J Proteome Res. 2007;6(1):250-62.
8. Li P, Zhou L, Zhao T, Liu X, Zhang P, Liu Y, et al. Caspase-9: structure, mechanisms and clinical application. Oncotarget. 2017;8(14):23996-24008.
9. Allan LA, Clarke PR. Apoptosis and autophagy: regulation of caspase‐9 by phosphorylation. FEBS J. 2009;276(21):6063-73.
10. Fisher CL, Pei GK. Modification of a PCR Based Site-Directed Mutagenesis Method. Biotechniques. 1997;23(4):570-4.
11. Kurokawa M, Kornbluth S. Caspases and kinases in a death grip. Cell. 2009;138(5):838-54.
12. Serrano BP, Hardy JA. Phosphorylation by protein kinase A disassembles the caspase-9 core. Cell Death Differ. 2018;25(6):1025-39.
13. Almeida VM, Marana SR. Optimum temperature may be a misleading parameter in enzyme characterization and application. PLoS One. 2019;14(2):e0212977.
14. Huber KL, Serrano BP, Hardy JA. Caspase-9 CARD: core domain interactions require a properly formed active site. Biochem J. 2018;475(6):1177-1196.
15. Garcia-Calvo M, Peterson EP, Rasper DM, Vaillancourt JP, Zamboni R, Nicholson DW, et al. Purification and catalytic properties of human caspase family members. Cell Death Differ. 1999;6(4):362-369.
16. Yin Q, Park HH, Chung JY, Lin S-C, Lo Y-C, da Graca LS, et al. Caspase-9 holoenzyme is a specific and optimal procaspase-3 processing machine. Mol Cell. 2006;22(2):259-268.
ارسال پیام به نویسنده مسئول

ارسال نظر درباره این مقاله
نام کاربری یا پست الکترونیک شما:

CAPTCHA



XML   English Abstract   Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Shakeri R, Mahmoudian M, Khodarahmi R, Mohammadi S. Role of Serine 310 in the Activity and Temperature Profile of Human Caspase-9. SJKU 2023; 27 (6) :13-24
URL: http://sjku.muk.ac.ir/article-1-7188-fa.html

شاکری راحله، محمودیان محدثه، خدارحمی رضا، محمدی سهیلا. نقش سرین 310 در فعالیت آنزیمی و پروفایل دمایی کاسپاز-9 انسانی. مجله علمي دانشگاه علوم پزشكي كردستان. 1401; 27 (6) :13-24

URL: http://sjku.muk.ac.ir/article-1-7188-fa.html



بازنشر اطلاعات
Creative Commons License این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است.
دوره 27، شماره 6 - ( مجله علمی دانشگاه علوم پزشکی کردستان 1401 ) برگشت به فهرست نسخه ها
مجله علمی دانشگاه علوم پزشکی کردستان Scientific Journal of Kurdistan University of Medical Sciences
مجله علمی دانشگاه علوم پزشکی کردستان Scientific Journal of Kurdistan University of Medical Sciences
Persian site map - English site map - Created in 0.05 seconds with 46 queries by YEKTAWEB 4660