fa بررسی تأثیر ایمنومدولاتوری غلظت‌های مختلف عصاره پلی ساکاریدی قارچ گانودرما لوسیدوم بر عملکرد ماکروفاژهای صفاقی موش BALB/c عمومى General پژوهشي اصیل Original Research زمینه و هدف: قارچ گانودرما لوسیدوم (Ganoderma lucidum) به عنوان یک ایمونومدولاتور طبیعی مطرح شده است. هنوز بطور دقیق مشخص نشده است که چه ترکیبی از این عصاره مسئول اثرات ایمونومدولاتوری آن می‌باشد ولی به نظر می‌رسد که گیرنده ٣ کمپلمان (CR3) سطح سلولهای مجری سیستم ایمنی به عنوان پذیرنده بتا گلوکانها (β-glucan) که ترکیب اصلی این عصاره را تشکیل می‌دهد، عمل می‌نماید. از آنجایی که فعالیت آنزیم گلوکز-۶- فسفات دهیدروژناز (G6PD) در تنظیم عملکردهای ماکروفاژها از جمله تولید نیتریک اکساید نقش مهمی ایفا می‌کند، ما تأثیر این عصاره را بر viability، فعالیت آنزیم G6PD و تولید نیتریک اکساید (NO) در ماکروفاژهای صفاقی موش BALB/c تیمار شده بررسی کردیم. روش بررسی: ابتدا ماکروفاژهای صفاقی موش BALB/c جدا شده و با غلظتهای(0.001,0.01,0.1, 1,10,100 g/ml) از عصاره پلی ساکاریدی قارچ گانودرما لوسیدوم (GL-PS) تیمار شدند و درصد زنده بودن ماکروفاژها بعد از ۲۴ ساعت انکوباسیون با استفاده از تست MTT بررسی شد و دوز مؤثر 0.1 g/ml تعیین گردید. برای تعیین فعالیت ویژه آنزیم گلوکز-6-فسفات دهیدروژناز (G6PD) ماکروفاژها به مدت ۲۴ ساعت با دوز 0.1 g/ml از GI-PS انکوبه شدند سپس ماکروفاژها را توسط سونیکاسیون لیز کرده و فعالیت ویژه آنزیم G6PD با سنجش تغییر جذب NADPH در طول موج 339 nm و تعیین غلظت پروتئین با روش برادفورد در عصاره رویی سلولی بدست آمد. همچنین بعد از ۱۸ساعت انکوباسیون، میزان تولید نیتریک اکساید (NO) با استفاده از روش رنگ سنجی گریس سنجیده شد. یافته‌ها: بر طبق نتایج حاصله دوز ۱/۰ میکروگرم در میلی‌لیتر از عصاره پلی‌ساکاریدی گانودرما لوسیدوم در مقایسه با سایر دوزها، بیشترین تأثیر را روی درصد زنده بودن (ضریب تحریک) ماکروفاژهای صفاقی داشت (05/0p<). همچنین مشخص شد که دوز 1/۰ میکروگرم در میلی‌لیتر GL-PS منجر به افزایش تولید NO و افزایش فعالیت ویژه آنزیم G6PD می‌شود (05/0p<). نتیجه‌گیری: قارچ گانودرما لوسیدوم، به عنوان یک قارچ دارویی، در کشورهای آسیای شرقی بویژه در چین بطور گسترده‌ای جهت افزایش کیفیت زندگی و طول عمر مصرف می‌شود. ما بعد از انجام این تحقیق نتیجه گرفتیم که عصاره GL-PS اثر ایمونومدولاتوری بر فعالیت ماکروفاژها دارد. بنابر این می‌توان از عصاره پلی ساکاریدی این قارچ به عنوان یک عامل تقویت‌کننده سیستم فاگوسیتی در برابر عوامل عفونی و پاتوژنهایی چون انگل لیشمانیا استفاده کرد که تولید نیتریک اکساید توسط ماکروفاژها در برابر آنها نقش مهمی در دفاع علیه آنها دارد. کلید واژه‌ها: عصاره پلی ساکاریدی گانودرما لوسیدوم، آنزیم گلوکز-۶- فسفات دهیدروژناز، نیتریک اکساید، تست MTT وصول مقاله: 29/11/84 اصلاح نهایی: 29/7/85 پذیرش مقاله: 30/9/85 Background and Aim: Ganoderma Lucidum has been regarded as a natural immunomodulator. The exact carbohydrate epitope responsible for the immunomodulatory activity and its receptor have not been identified, but it seems likely that it is the receptor CR3 (complement receptor 3) which can bind to β-glucan polysachharide. Because glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PD) activity has a critical role in the regulation of macrophage functions such as nitric oxide (NO) production, we assessed the immunomodulatory effect of GL-PS in BALB/c peritoneal macrophages. Materials and Methods: For this purpose, BALB/c mice peritoneal macrophages were isolated and treated with various concentrations of GL-PS (0.001, 0.01, 0.1, 1, 10, 100 g/ml). After 24 hours, the viability of treated macrophages was measured by MTT assay at 540 nm and the effective dose was determined to be 0.1µg/ml. Then, macrophages were sonicated and special activity of G6PD was measured in the cell extracts by measuring the alterations in NADPH absorption at 339nm and protein concentration by Bradford method. Also, NO production was determined by use of Griess-reagent after 18 hours. Results: Results of this study showed that 0.1 g/ ml of GL-PS had the maximal effect on cell viability (stimulation Index) in comparison to other doses )0.05<p(. Also, 0.1g/ ml of GL-PS increased G6PD special activity and NO production in macrophages )0.05>p(. Conclusion: Ganoderma Lucidum is widely used in traditional Chinese medicine to improve quality and length of life. We concluded that GL-PS extract had an immunomodulatory effect on macrophage functions. So, it can be a good choice to augment phagocytic system against infectious agents and pathogens such as Leishmania species, because nitric oxide production plays a critical role against these organisms. عصاره پلی ساکاریدی گانودرما لوسیدوم، آنزیم گلوکز-۶- فسفات دهیدروژناز، نیتریک اکساید، تست MTT Ganoderma Lucidum polysaccharide extract, Glucose-6-phosphate dehydrogenase, Nitric oxide, MTT assay. 10 17 http://sjku.muk.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-85&slc_lang=fa&sid=1 Shahrzad Zamani Taghizadeh Raabe شهرزاد زمانی تقی زاده رابع zamani_imnl@yahoo.com 54003194753284600419 54003194753284600419 Yes Ahmad Zavaran Hosseini احمد زواران حسینی 54003194753284600420 54003194753284600420 No Zahir Mohammad Hassan زهیر محمد حسن 54003194753284600421 54003194753284600421 No Somayeh Shahrokhi سمیه شاهرخی 54003194753284600422 54003194753284600422 No Mohammad Shafiea Mojadadi محمد شفیع مجددی 54003194753284600423 54003194753284600423 No