fa بررسی تأثیرات اسیدرتینوئیک بر بیان ژن‌های HNF4α و Cdx-2 در سلول‌های Caco-2 به‌عنوان مدلی از سد روده‌ای پزشکی- انکولوژی Oncology پژوهشي اصیل Original Research <span style="font-size:12pt"><span style="text-justify:kashida"><span style="text-kashida:0%"><span style="line-height:normal"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b><span b="" lang="FA" style="font-family:" zar="">زمینه و هدف:</span></b><span b="" lang="FA" style="font-family:" zar=""> اسیدرتینوئیک (</span>RA<span b="" lang="FA" style="font-family:" zar="">)</span> <span b="" lang="FA" style="font-family:" zar="">در محافظت از سد روده‌ای، القای تمایز، تکثیر سلول‌های اپیتلیالی نقش بسزایی دارد. در مورد مکانیسم القای آپوپتوز توسط </span>RA<span b="" lang="FA" style="font-family:" zar=""> فرضیات متعددی وجود دارد؛ اما مطالعات چندانی در رابطه با نقش </span>HNF4&alpha;<span b="" lang="FA" style="font-family:" zar=""> و </span>Cdx-2<span b="" lang="FA" style="font-family:" zar=""> در سلول‌های روده‌ای صورت نگرفته است. هدف از این مطالعه بررسی زنده‌مانی و بیان دو ژن اشاره شده متعاقب تجویز </span>RA<span b="" lang="FA" style="font-family:" zar=""> در سلول‌های </span>Caco-2<span b="" lang="FA" style="font-family:" zar=""> به عنوان مدلی از سلول‌های اپیتلیال روده است.</span></span></span></span></span></span></span></span><br> <span style="font-size:12pt"><span style="text-justify:kashida"><span style="text-kashida:0%"><span style="line-height:normal"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b><span b="" lang="FA" style="font-family:" zar="">مواد و روش&shy; ها:</span></b><span b="" lang="FA" style="font-family:" zar=""> در مطالعه حاضر از سلول‌های </span>Caco-2<span b="" lang="FA" style="font-family:" zar=""> استفاده شد که به مدت ۷۲ ساعت در معرض اسیدرتینوئیک با غلظت‌های ۱۰، ۲۰ و ۴۰ میکرومولار قرار داشتند. این نمونه‌ها، به مدت ۲۴ و ۴۸ ساعت به منظور انجام تست و بررسی اثرات سمیت سلولی با اندازه‌گیری فعالیت آنزیم میتوکندریایی و با استفاده از روش </span>MTT<span b="" lang="FA" style="font-family:" zar=""> تعیین شدند. بیان ژن‌های </span>HNF₄&alpha;<span b="" style="font-family:" zar=""> و </span>Cdx-2<span b="" lang="FA" style="font-family:" zar=""> در سطح </span>mRNA<span b="" lang="FA" style="font-family:" zar=""> با تکنیک پی‌سی‌آر در زمان حقیقی مورد بررسی قرار گرفتند.</span></span></span></span></span></span></span></span><br> <span style="font-size:12pt"><span style="text-justify:kashida"><span style="text-kashida:0%"><span style="line-height:normal"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b><span b="" lang="FA" style="font-family:" zar="">یافته‌ها:</span></b><span b="" lang="FA" style="font-family:" zar=""> نتایج نشان داد 48 ساعت پس از افزودن 20 و 40 میکرومولار </span>RA<span b="" lang="FA" style="font-family:" zar="">، تعداد سلول‌ها به صورت وابسته به غلظت کاهش یافت. در ساعات ۲۴ و ۴۸ اولیه وابستگی به غلظت بیان ژن </span>HN_F4&alpha;<span b="" style="font-family:" zar=""> افزایش یافت و در مقابل، بیان ژن </span>Cdx-2<span b="" lang="FA" style="font-family:" zar=""> نیز در این ساعات میزان نزولی داشت. بر اساس نتایج به دست آمده طی 72 ساعت مطالعه، مشاهده شد که به دلیل کاهش سلول‌های زنده و برهم خوردن هموستاز سلولی، بیان ژن‌ها نسبت به کنترل کاهش یافته است.</span></span></span></span></span></span></span></span><br> <span style="font-size:12pt"><span style="line-height:normal"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b><span b="" lang="FA" style="font-family:" zar="">نتیجه‌گیری:</span></b><span b="" lang="FA" style="font-family:" zar=""> استفاده از </span>RA<span b="" lang="FA" style="font-family:" zar=""> در غلظت‌های بالا می‌تواند باعث برهم خوردن هموستاز روده به واسطه عدم تعادل بین دو ژن مورد مطالعه باشد؛ لذا در تجویز مشتقات اسیدرتینوئیک باید با توجه به هدف از درمان غلظت را انتخاب کرد.</span></span></span></span></span></span><br> &nbsp; <span style="font-size:12pt"><span style="line-height:normal"><span style="unicode-bidi:embed"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b>Background and Aim:</b> Retinoic acid (RA) is involved in protecting the intestinal barrier, inducing differentiation, growth and proliferation of epithelial cells. There are several hypotheses about the mechanism of induction of apoptosis by RA, but few studies have been performed on the role of HNF4&alpha; and Cdx-2 in intestinal cells. The aim of this study was to evaluate the survival and expression of these two genes following administration of RA in Caco-2 cells as a model of intestinal epithelial cells.</span></span></span></span><br> <span style="font-size:12pt"><span style="line-height:normal"><span style="unicode-bidi:embed"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b>Materials and Methods:<i> </i></b>In the present study, Caco-2 cells were used and exposed to retinoic acid at concentrations of 10, 20, and 40 &mu;M for 72 hours. After incubation for 24 and 48 hours, these samples were assigned to evaluate the effects of cytotoxicity by measuring mitochondrial enzyme activity using the MTT method. The expression levels of HNF4&alpha; and Cdx-2 genes at the mRNA level were examined by real-time PCR technique.</span></span></span></span><br> <span style="font-size:12pt"><span style="line-height:normal"><span style="unicode-bidi:embed"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b>Results:<i> </i></b>The results showed that 48 hours after adding 20 and 40 &mu;M RA, the number of cells decreased in a concentration-dependent manner. In the first 24 and 48 hours, the dependence on the expression concentration of the HNF4&alpha; gene increased, and in contrast, the expression of the Cdx-2 gene decreased during these hours. Based on the results obtained during the 72 hours of the study, the expression levels of the genes decreased compared to those in the control which was due to the reduction of living cells and disruption of cellular homeostasis.</span></span></span></span><br> <span style="font-size:12pt"><span style="line-height:normal"><span style="unicode-bidi:embed"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b>Conclusion: </b>Use of RA in high concentrations can cause disruption of intestinal homeostasis due to an imbalance between the two genes. Therefore, concentration of retinoic acid derivatives should be selected according to the purpose of treatment.</span></span></span></span><br> &nbsp; اسیدرتینوئیک, HNF4α, Cdx-2, سد روده‌ایی, Caco-2 Retinoic acid, HNF4α, Cdx-2, Intestinal barrier, Caco-2 1 11 http://sjku.muk.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-6798-1&slc_lang=fa&sid=1 Mahshad Karambeigi مهشاد کرم‌بیگی mahshadkarambeigidvm@gmail.com 5400319475328460057920 5400319475328460057920 No Department of Clinical Sciences, Faculty of Veterinary Medicine, Razi University, Kermanshah, Iran گروه علوم درمانگاهی، دانشگاه رازی، کرمانشاه، ایران Hadi Cheraghi هادی چراغی h.cheraghi@razi.ac.ir 2755780606 5400319475328460057921 Yes Department of Clinical Sciences, Faculty of Veterinary Medicine, Razi University, Kermanshah, Iran گروه علوم درمانگاهی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه رازی، کرمانشاه، ایران Arash Alizadeh آرش علی‌زاده arash.alizadeh@urmia.ac.ir 5400319475328460057922 5400319475328460057922 No Department of Basic Sciences, Faculty of Veterinary Medicine, Urmia University, Urmia, Iran. گروه علوم پایه، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه ارومیه، ارومیه، ایران