fa جدا سازی و کشت اولیه سلول‌های اپی‌تلیال تیموس رت با استفاده از آنزیم اکتینیدین میوه کیوی عمومى General پژوهشي اصیل Original Research <p> <strong> چکیده </strong></p><p> <strong><i> زمینه و هدف </i></strong><strong>: </strong>برای تجزیه ماتریکس خارج سلولی جداسازی و کشت اولیه سلولها از آنزیمهای پروتئولیتیک بخصوص کلاژناز برای هضم بافت استفاده می‌شود. یافتن پروتئاز جایگزین کلاژناز در منابع گیاهی یا جانوری که راحت‌تر و با هزینه کمتر تخلیص گردد، از اهمیت ویژه‌ای برخوردار است. به همین علت در مطالعه حاضر از آنزیم اکتینیدین که به وفور در میوه کیوی یافت می‌شود، جهت جداسازی سلولهای اپی‌تلیال تیموس موش صحرایی استفاده شد. </p><p> <strong><i> روش بررسی </i></strong><strong>: </strong>آنزیم اکتیندین تخلیص شده از میوه کیوی در دامنه غلظت 1 تا 10 میلی‌گرم در میلی‌لیتر و زمان 3، 4 یا 5 ساعت برای جداسازی سلولهای اپی تلیال تیموس موش صحرایی استفاده شد و سلولهای اپی تلیال تیموس جداشده در پلیت کلاژن دار همراه محیط کشت willams E کشت داده شدند. درصد زنده ماندن سلولهای اپی تلیال با استفاده از تست تریپان بلو و مرفولوژی سلولها در مراحل کشت پس از رنگ‌آمیزی پاپا نیکولا بررسی شد. </p><p> <strong><i> یافته‌ها </i></strong><strong>: </strong>اکتینیدین در غلظت 4 میلی‌گرم در میلی‌لیتر در مدت زمان 4-5/3 ساعت ماتریکس خارج سلولی تیموس موش بزرگ را هضم و سلولهای اپی تلیال تیموس را بطور مطلوب جدا نمود. درصد بقای سلولهای جدا شده 95-90 درصد تخمین زده شد. </p><p> <strong><i> نتیجه‌گیری </i></strong><strong>: </strong>آنزیم اکتینیدین میوه کیوی در مقایسه با کلاژناز، پروتئاز مناسبی برای جداسازی سلولهای اپی تلیال تیموس موش و احتمالاً سایر حیوانات است. لذا با توجه به سادگی و کم هزینه بودن اکتینیدین، این آنزیم جایگزین مناسبی برای کلاژناز به هدف جداسازی سلولهای اپی تلیال تیموس و کشت این سلولها است. </p> <p> <strong> ABSTRACT </strong></p><p> <strong><i> Background and Aim: </i></strong>Proteolytic enzymes specially collagenase are used for degredation of extracellular matrix, cell isolation and primary cell culture. It is important to substitute a low cost and easily obtained plant or animal protease for collagenase. In the present study the enzyme actinidin which is found abundantly in kiwi fruit, was used to isolate thymic epithelial cells from rat thymus. </p><p> <strong><i> Material and Methods: </i></strong>Actinidin with different concentrations (from 1 to 10 mg/ml) and at different times (3, 4 or 5h) was used to isolat rat thymic epithelial cells. The isolated epithelial cells were cultured on collagen coated dishes in willam's E medium. The percentage of viable isolated cells was estimated by the trypan blue test and morphology of the cells examined microscopically after staining with Papanicoloau. </p><p> <strong><i> Results: </i></strong><strong></strong>Actinidin with a concentration of 4 mg/ml for 3.5-4 h digested extra-cellular matrix of rat thymus and isolated thymic epithelial cell appropriately. The rate of viability of the separated cells was estimated 90-95% in all isolates. </p><p> <strong><i> Conclusion: </i></strong><strong></strong>The results of this study indicated actinidin is comparable to collagenase in isolation of epithelial cells from the thymus of rat and probably other animals. Considering its simpler purification and its low cost, this enzyme is a suitable and safe substitute for collagenase which can be used for isolation of thymic epithelial cells from rat and probably other animals. </p> کلید واژه‌ها: اکتینیدین، سلولهای اپی تلیال تیموس، کشت اولیه، کلاژناز key words: Actinidin, Thymic epithelial cells, Primary culture, Collagenase. 36 43 http://sjku.muk.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-64&slc_lang=fa&sid=1 K Mansouri کامران منصوری 54003194753284600281 54003194753284600281 No A Mostafaie علی مصطفایی 54003194753284600282 54003194753284600282 Yes Z Shirvani زینب شیروانی 54003194753284600283 54003194753284600283 No A Bidmeshkipour علی بید مشکی پور 54003194753284600284 54003194753284600284 No