fa جداسازی و تعیین گونه‌های بروسلا از نمونه‌های خونی بیماران بروسلوزیس با روشهای بیوشیمیایی، PCR و سرولوژی در استان کردستان عمومى General پژوهشي اصیل Original Research چکیده زمینه و هدف: بروسلوزیس یک عامل عمده زئونوز بوده و استان کردستان در ایران یکی از مناطق اندمیک برای شیوع این بیماری است. هدف از این مطالعه جداسازی بروسلا از بیماران بروسلوزیس و تعیین گونه‌های این باکتری به منظور بررسی شیوع این سویه‌ها در استان کردستان می‌باشد. روش بررسی: از ۶۰ بیمار بروسلوز دارای علایم مراجعه‌کننده به بیمارستان توحید سنندج نمونه گیری از خون انجام گرفت. هر نمونه در محیط کشت خون (BACTEC) تلقیح شده و در شرایط دمایی ◦C۳٧ به مدت ۵ روز قرار گرفت. پس از این مدت، نمونه‌ها روی محیط بروسلا آگار به مدت ۳ روز کشت داده شد و سپس برای تشخیص باکتری‌های رشد کرده، روش PCR و تست‌های اوره آز، تولید H2S، کاتالاز، اکسیداز، رنگ‌آمیزی گرم و رشد روی محیط‌های دارای رقت‌های مختلف از رنگهای تایونین و فوشین انجام شد. همچنین از روش آگلوتیناسیون اختصاصی برای تعیین گونه این باکتریها نیزاستفاده گردید. یافته‌ها: از۶۰ نمونه خون گرفته شده از بیماران بروسلوزی، ۱٨ سوش بروسلا جداسازی شد. پس از انجام تستهای بیوشیمیایی، کل باکتریهای جدا شده به عنوان بروسلا ملی تنسیس با بیووار یک تا سه شناخته شد. نتایج آگلوتیناسیون نشان داد که ۱۴ سوش جزو بیوار ۱ بروسلا ملی تن سیس و 4 سوش جزو بیوار ۳ می‌باشند. نتیجه‌گیری: این مطالعه نشان می‌دهد که شیوع بروسلوز با عامل بروسلا ملی تن سیس در استان کردستان بالا بوده و تلاش برای ریشه کن سازی این باکتری در این منطقه باید اختصاصی برای این باکتری باشد. کلید واژه‌ها: جداسازی بروسلا، تعیین گونه، استان کردستان، PCR وصول مقاله: 7/11/89 اصلاحیه نهایی: 11/3/90 پذیرش مقاله: 17/3/90 ABSTRACT Background and Aim: Brucellosis is a major cause of zoonosis and is endemic in Kurdistan Province in Iran. The purpose of this study was to isolate Brucella species from brucellosis patients and identify different species of this bacterium in order to determine the prevalence of these species in Kurdistan Province. Material and Methods: 60 blood samples were obtained from brucellosis patients with clinical symptoms of the disease in Tohid Hospital in Sanandaj. The samples were cultured in BACTEC medium and incubated at 35 0C for 5 days. Then, the samples were cultured on Brucella agar for 3 days. For detection of the bacteria we used catalase, oxidase and urease tests, PCR, Gram stain and media with various dilutions of Thionin and Fuschin dyes. Also we used agglutination test for identification of Brucella species. Results: 18 Brucella strains were isolated from 60 blood samples of the patients. PCR and biochemical methods revealed that all the 18 isolated bacteria were Brucella melitensis.The results of agglutination test showed that 14 bacteria belonged to biovar 1 and 4 bacteria to biovar 3. Conclusion: This study showed a high prevalence of brucellosis due to Brucella melitensis in Kurdistan Province and efforts in this region should be aimed at the eradication of this bacterium. Key word: Brucella isolation, Species detection, Kurdistan Province, PCR Conflict of Interest: Nill Received: Jan 27, 2011 Accepted: Jun 7, 2011 جداسازی بروسلا، تعیین گونه، استان کردستان، PCR Brucella isolation, Species detection, Kurdistan Province, PCR 1 8 http://sjku.muk.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-298&slc_lang=fa&sid=1 Mohammad Reza Rahmani محمد رضا رحمانی 540031947532846002367 540031947532846002367 No Kurdistan University of Medical Sciences دانشگاه علوم پزشکی کردستان Yousef Motaharinia یوسف مطهری نیا 540031947532846002368 540031947532846002368 No Kurdistan University of Medical Sciences دانشگاه علوم پزشکی کردستان Mohammad Ali Rezaie محمد علی رضایی 540031947532846002369 540031947532846002369 No Kurdistan University of Medical Sciences دانشگاه علوم پزشکی کردستان Neda Asadzadeh ندا اسدزاده 540031947532846002370 540031947532846002370 No Kurdistan University of Medical Sciences دانشگاه علوم پزشکی کردستان vorya Hoseini وریا حسینی 540031947532846002371 540031947532846002371 No Kurdistan University of Medical Sciences دانشگاه علوم پزشکی کردستان Behzad Mohsen Pour بهزاد محسن پور 540031947532846002372 540031947532846002372 No Kurdistan University of Medical Sciences دانشگاه علوم پزشکی کردستان Nasrin Bahmani نسرین بهمنی 540031947532846002373 540031947532846002373 No Kurdistan University of Medical Sciences دانشگاه علوم پزشکی کردستان Mohammad Saeid hakhamaneshi محمد سعید هخامنشی 540031947532846002374 540031947532846002374 No Kurdistan University of Medical Sciences دانشگاه علوم پزشکی کردستان Kiomars Rashidi کیومرث رشیدی K.rashidi20@gmail.com 540031947532846002375 540031947532846002375 Yes Kurdistan University of Medical Sciences دانشگاه علوم پزشکی کردستان