fa بررسی تأثیر بیوتین و اسیدفولیک بر حرکت، حیات، شکل، تراکم کروماتین و تمامیت غشا اسپرم انجماد و ذوب شده در مردان نورموزواسپرمی عمومى General پژوهشي اصیل Original Research <div style="text-align: justify;"><strong><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">زمینه و هدف</span></span></strong><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">: انجماد</span></span> <span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">یکی از تکنیکی رایج در باروری-ناباروری است، با تولید رادیکال‌های فعال اکسیژن موجب آسیب سلول اسپرم و عملکرد آن می‌شود. تشخیص سلامت و قدرت باروری اسپرم انجماد، ارزیابی مارکرهای مختلف در مردان ناباروری است. در این مطالعه، هدف ما بررسی تأثیر بیوتین و اسید فولیک بر حرکت، حیات، شکل، تراکم کروماتین و تمامیت غشا اسپرم انجماد و ذوب شده در مردان نورموزواسپرمی است.</span></span><br> <strong><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">مواد و روش</span></span></strong> <strong><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">ها:</span></span></strong><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> در این مطالعه‌ی تجربی، 30 نمونه نورموزواسپرمی جمع‌آوری شد. هر نمونه، شامل گروه تازه قبل از </span></span><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">انجماد</span></span><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">، گروه‌های </span></span><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">انجماد</span></span><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> شده ی کنترل، بیوتین</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:12.0pt;">10 mM)</span></span><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">)، اسیدفولیک </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:12.0pt;">(50 nM)</span></span><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> و ترکیب بیوتین (</span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:12.0pt;">10 mM</span></span><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">) و اسید فولیک </span></span><span dir="LTR"><span style="font-size:12.0pt;">(50 nM)</span></span><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">.</span></span><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> اسپرم‌ها به مدت دو هفته با تکنیک رایج انجماد در دمای 196- درجه‌ی سانتی‌گراد </span></span><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">انجام </span></span><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">و سپس ذوب شدند. نمونه ها قبل و بعد از </span></span><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">انجماد </span></span><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">از لحاظ حرکت با نرم افزار آنالیز اسپرم </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">computer-aided sperm analysis</span></span></span><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> ارزیابی شد. حیات اسپرم با رنگ آمیزی ائوزین-نگروزین، تراکم کروماتین با رنگ آمیزی تولوییدین بلو (</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">Toluidine blue</span></span></span><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">) و تمامیت غشا با </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">hypo Osmotic swelling Test</span></span></span><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> بررسی شدند.</span></span><br> <strong><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">یافته ها</span></span></strong><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">:</span></span><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> قبل از</span></span><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> انجماد </span></span><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">حرکت، حیات، شکل ،</span></span> <span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">تراکم کروماتین، تمامیت غشا اسپرم در همه گروه‌ها بیشتر و اسپرم‌های بی‌حرکت کمتر دیده شد (0/001</span></span><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">&nbsp;</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">p<</span></span></span><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">). کیفیت </span></span><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">کروماتین، در گروه‌های اسید فولیک،</span></span><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> بیوتین+اسیدفولیک وبیوتین نسبت به کنترل بیشتر بود. میانگین حیات اسپرم در سه گروه بیشتر از کنترل بود. اسپرم با غشا سالم در گروه‌های اسیدفولیک، بیوتین و ترکیب هر دو بیشترازکنترل بود (0/001</span></span><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">&nbsp;</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">p<</span></span></span><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">)</span></span><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">. پس از انجماد ارتباط مثبت بین کیفیت طبیعی کروماتین اسپرم و یکپارچگی غشا اسپرم دیده شد.</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;"></span></span></span><br> <strong><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">نتیجه‌گیری</span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">:</span></span></span></strong><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> بیوتین و اسید فولیک اثر محافظتی روی کیفیت کروماتین، غشای سالم، حیات اسپرم و نقش مهمی در حفظ پارامترهای اسپرم بعد از انجماد داشت.</span></span></div> <div style="text-align: justify;"><strong>Background and aim</strong>: Cryopreservation is one of the common techniques in the management of infertility, which can damage the sperm cell and its function by producing reactive oxygen species. To determine health and fertility of cryopreserved sperm, we evaluated different markers in infertile men. The aim of this study was to investigate the effect of biotin and folic acid on motility, viablity, shape, chromatin density and membrane integrity of cryopreserved and thawed sperm in normozoospermic men.<br> <strong>Material and Method</strong>: In this experimental study, 30 samples were collected from normozoospermic men. Every sample included fresh pre-cryopreservation group, cryopreserved control groups, biotin (10 mM), folic acid (50 nM), and combination of biotin (10 mM) and folic acid (50 nM) groups. Sperms were frozen for two weeks using the usual freezing technique at -196 &deg; C and then thawed. Samples were evaluated for motility before and after freezing using computer-aided sperm analysis software. We assessed sperm viability by eosin-negrosin staining, chromatin density by toluidine blue staining and membrane integrity by hypo osmotic swelling test.<br> <strong>Results<span dir="RTL">:</span></strong> Before cryopreservation, motility, viability, chromatin density, sperm membrane integrity were higher and the number of immotile sperms were lower in all groups (p <0.001). Quality of chromatin was higher in the groups of folic acid, biotin + folic acid and biotin than in the control group. Mean sperm viability was higher in the three above mentioned groups than in the control group. We found higher sperm membrane integrity in the folic acid, biotin and combination groups than in control group (p <0.001). After cryopreservation, a positive correlation was found between sperm chromatin quality and membrane integrity.<br> <strong>Conclusion</strong>: Biotin and folic acid showed a protective effects on chromatin quality, membrane integrity, viability of the sperms and played an important role in maintaining sperm parameters after cryopreservation.</div> بیوتین, اسید فولیک, کروماتین, حیات, اسپرم, انجماد Biotin, Folic acid, Chromatin, Viability, Sperm, Cryopreservation 38 49 http://sjku.muk.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-3304-3&slc_lang=fa&sid=1 reyhaneh montazeri ریحانه منتظری rmontazeri93@gmail.com 5400319475328460044456 5400319475328460044456 No Department of Anatomical Sciences, School of Medicine, Isfahan University of Medical Sciences, Isfahan, Iran. دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، دانشکده پزشکی ، گروه علوم تشریح، اصفهان، ایران F arhad Golshan iranpour فرهاد گلشن ایرانپور fgolshaniranpour@yahoo.com 5400319475328460044457 5400319475328460044457 No Department of Anatomical Sciences, School of Medicine, Isfahan University of Medical Sciences, Isfahan, Iran دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، دانشکده علوم پزشکی اصفهان، گروه علوم تشریحی، اصفهان، ایران. Gholam reza dashti غلامرضا دشتی dashti@med.mui.ac.ir 5400319475328460044458 5400319475328460044458 Yes Department of Anatomical Sciences, School of Medicine, Isfahan University of Medical Sciences, Isfahan, Iran دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، دانشکده علوم پزشکی اصفهان، گروه علوم تشریحی، اصفهان، ایران. Shahla Ishaqi شهلا اسحاقی grd_dashti@yahoo.com 5400319475328460044459 5400319475328460044459 No Shahid behesti hospital, Isfahan University of Medical Sciences, Isfahan, Iran بیمارستان شهید بهشتی، دانشگاه علوم پزشکی اصفهان، اصفهان، ایران Abol Fazl dashti ابوالفضل دشتی Drdashtiabolfazl@gmail.com.com 5400319475328460044460 5400319475328460044460 No Saint Maryam Fertility and Infertility center, Shahid beheshti hospital, Isfahan, Iran. دانشگاه آزاد شهرکرد، دانشکده دامپزشکی، شهرکرد، ایران