fa بررسی اثر کلستاز بر بیان ژن پروتئین مربوط به دینامین- 1 درکبد موش بزرگ آزمایشگاهی عمومى General پژوهشي اصیل Original Research <strong><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;">زمینه و هدف:</span></span></strong><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> در بیماری کلستاز انسداد جریان صفرا منجر به تجمع اسیدهای صفراوی در کبد و بروز نارسایی&rlm;های متابولیکی شده و در نهایت منجر به مرگ نکروزی و آپوپتوزی سلولهای کبدی می&rlm;شود. میتوکندری&rlm;ها اندامکهای درون سلولی هستند که بیشترین منبع تولید انرژی سلولی بوده و</span></span><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> به&rlm;طور پیوسته تقسیم و مجدداً با هم ترکیب می‌شوند. این فرآیندهای پویا را شکافت و هم&rlm;جوشی غشایی می&rlm;نامند. تغییر پویایی میتوکندری در بیماری کبدی کلستاز مشاهده شده است. </span>ژن پروتئین مربوط به دینامین نوع -1 از جمله پروتئینهای دخیل در مسیر شکافت غشای میتوکندری است و در بروز آپوپتوز نقش دارد. در این مطالعه اثر کلستاز بر تغییرات بیان ژن </span><em><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">Drp1</span></span></span></em><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> در کبد موش&rlm;های صحرایی مورد بررسی قرار گرفت. </span></span><br> <strong><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;">روش بررسی:</span></span></strong><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> در این مطالعه تجربی موش‌های بزرگ آزمایشگاهی نر نژاد ویستار (وزن <span style="color:black;">&nbsp;25</span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">&plusmn;</span></span></span><span style="color:black;"><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;">290</span></span></span><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;">گرم) در سه گروه کنترل (بدون جراحی)، شم (جراحی بدون انسداد مجرای صفراوی) و کلستاز (جراحی همراه با انسداد مجرای صفراوی) استفاده شد. در روز 28ام پس از انسداد مجرای صفراوی، حیوانات توزین و به منظور بررسی&rlm; سطح بیلی روبین و آنزیم&rlm;های عملکرد کبدی از آنها خون گیری انجام شد. سپس نمونه&rlm;گیری از بافت کبد جهت بررسی شاخص&rlm;های هیستوپاتولوژیک و همچنین ارزیابی سطح بیان ژن پروتئین مربوط به دینامین نوع <a href="#_ftn1" name="_ftnref1" title=""><span dir="LTR"><span style="font-family:perpetua,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">[1]</span></span></span></a></span></span>-1 انجام شد.<br> <strong><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;">یافته‌ها:</span></span></strong><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> نتایج این مطالعه افزایش سطوح سرمی بیلی&shy;روبین کل<a href="#_ftn2" name="_ftnref2" title=""><span dir="LTR"><span style="font-family:perpetua,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">[2]</span></span></span></a></span></span> و آنزیم&rlm;های کبدی آلانین آمینوترانسفراز<a href="#_ftn3" name="_ftnref3" title=""><span dir="LTR"><span style="font-family:perpetua,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">[3]</span></span></span></a>، آسپارتات آمینوترانسفراز<a href="#_ftn4" name="_ftnref4" title=""><span dir="LTR"><span style="font-family:perpetua,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">[4]</span></span></span></a> و آلکالین آمینوترانسفراز <a href="#_ftn5" name="_ftnref5" title=""><span dir="LTR"><span style="font-family:perpetua,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">[5]</span></span></span></a> را در گروه کلستاز نسبت به گروه&rlm;های شم و کنترل نشان داد (001/0<em><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">P</span></span></span></em><span dir="LTR"><span style="font-family:perpetua,serif;"><span style="font-size:12.0pt;"><</span></span></span><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> و </span></span><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;">001/0</span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">P</span></span></span></em><span dir="LTR"><span style="font-family:perpetua,serif;"><span style="font-size:12.0pt;"><</span></span></span><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;">). نتایج بررسی شاخص&shy;های بافتی در گروه کلستاز، افزایش مجاری صفراوی، نکروز بافت کبد و گسترش بافت فیبروزی را نشان داد. نتایج </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">RT-PCR</span></span></span> <span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;">افزایش معنادار (001/0</span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">P</span></span></span></em><span dir="LTR"><span style="font-family:perpetua,serif;"><span style="font-size:12.0pt;"><</span></span></span><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;">) بیان ژن </span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">Drp1</span></span></span></em> <span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;">کبد گروه کلستاز را نسبت به گروه&rlm;های شم و کنترل نشان داد.</span></span><br> <strong><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;">نتیجه&rlm;گیری: </span></span></strong><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;">این نتایج نشان می&rlm;دهد که افزایش بیان ژن </span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">Drp1</span></span></span></em> <span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;">در کبد موش‌های بزرگ آزمایشگاهی کلستازی می‌تواند مربوط به نقش پویایی میتوکندری درآسیب&rlm;شناسی نارسایی کلستاز باشد.</span></span><br> <strong><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;">کلید واژه&rlm;ها: </span></span></strong><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;">کبد، کلستاز، پویایی میتوکندری، ژن پروتئین مربوط به دینامین نوع -1</span></span><br> <span dir="RTL"><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;">وصول مقاله:11/11/95 اصلاحیه نهایی:18/2/96 پذیرش:23/2/96</span></span></span> <div>&nbsp; <hr align="left" size="1" width="33%" > <div id="ftn1"><a href="#_ftnref1" name="_ftn1" title=""><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">[1]</span></span></span></a> <span style="font-family:times new roman,serif;">Dynamin-related protein <span dir="RTL">)</span>Drp1<span dir="RTL">(</span></span></div> <div id="ftn2"><a href="#_ftnref2" name="_ftn2" title=""><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">[2]</span></span></span></a> <span style="font-family:times new roman,serif;">Total bilirubin(TBil)</span></div> <div id="ftn3"><a href="#_ftnref3" name="_ftn3" title=""><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">[3]</span></span></span></a> <span style="font-family:times new roman,serif;">Alanine Aminotransferase (ALT)</span></div> <div id="ftn4"><a href="#_ftnref4" name="_ftn4" title=""><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">[4]</span></span></span></a> <span style="font-family:times new roman,serif;">Aspartate Aminotransferase (AST)</span></div> <div id="ftn5"> <h3 style="margin-top:0in;text-align:left;background:white;direction:ltr;unicode-bidi:embed;"><a href="#_ftnref5" name="_ftn5" title=""><span style="font-weight:normal;"><span style="color:windowtext;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">[5]</span></span></span></span></span></span></a> <span dir="RTL"><a href="https://www.google.com/url?sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=2&cad=rja&uact=8&ved=0ahUKEwi26ujU_OPPAhUCORQKHUtEBVQQFggeMAE&url=http%3A%2F%2Fwww.healthline.com%2Fhealth%2Falp&usg=AFQjCNFXA8stb8Y6n0ySDvIePcGeOONGDw&sig2=go8P9cIqRm6yQVdsDxoAvA&bvm=bv.135974163,d.bGs"><span dir="LTR" style="font-weight:normal;text-decoration:none;text-underline:none;"><span style="color:windowtext;"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:10.0pt;">Alkaline Phosphatase (ALP)</span></span></span></span></a></span></h3> &nbsp;</div> </div> <strong>Background and Aim: </strong>Cholestasis is characterized by impaired bile flow, which can cause accumulation of bile acids in the liver and development of metabolic disorders, <u>resulting </u>in hepatocellular necrosis and apoptosis. Mitochondria are a critical cellular organelle that produces most of the cellular energy. Mitochondrial morphology varies from an interconnected filamentous network to isolated dots. This processes are called mitochondrial fission and fusion. Disrupted mitochondrial morphology has been observed in cholestatic liver disease. Dynamin related protein 1 is one of the genes involved in mitochondrial fission and plays a role in apoptosis. In this study we investigated<em> Drp1</em> gene expression in the liver of cholestatic rats.<br> <strong>Materials and Methods: </strong>In this experimental study, male Wistar rats (290&plusmn;25g) were divided into three groups of control (non-operated), sham (operated without common bile duct ligation) and BDL (operated with common bile duct ligation). On the 28^th day of BDL, rats were weighed and sacrificed. Biochemical assays for measurement of bilirubin level and liver enzymes, and also dissection of liver tissue for histopathological analysis were performed. <em>Drp1 </em>gene expression was evaluated by semi-quantitative RT-PCR technique.<br> <strong>Results</strong>: The results showed that serum levels of total bilirubin and liver enzymes (ALT, AST, ALK) were significantly increased in BDL group compared to those in the control and sham operation groups (<em>P</em><0.0001 and <em>P</em><0.001). Histological examination revealed bile ductular hyperplasia, focal liver necrosis and fibrous tissue expansion in BDL group. The result of RT-PCR indicated significant increase of <em>Drp1</em> gene expression in the liver of the rats in BDL group compared to that in the other groups (<em>P</em><0.001).<br> <strong>Conclusion</strong><strong>:</strong> In this study we found that liver cholestasis increased expression of <em>Drp1</em> gene which led to increased mitochondrial-mediated apoptotic effect with resultant liver cell death.<br> <strong>Keywords</strong>: Liver, Cholestasis, Mitochondrial dynamics, Dynamin related protein-1 gene<br> <strong>Received: </strong>Jan 30, 2017<strong>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; Accepted: </strong>May 13, 2017 کبد, کلستاز, پویایی میتوکندری, ژن پروتئین مربوط به دینامین نوع -1 Liver, Cholestasis, Mitochondrial dynamics, Dynamin related protein-1 gene 68 79 http://sjku.muk.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-25-167&slc_lang=fa&sid=1 Farnoosh Khosrobakhsh فرنوش خسروبخش f.khosrobakhsh@uok.ac.ir 5400319475328460015306 5400319475328460015306 Yes Assistant Professor, Department of Biological Sciences, Faculty of Sciences, University of Kurdistan, Sanandaj, Iran. گروه علوم زیستی، دانشکده علوم، دانشگاه کردستان، سنندج، ایران. Mohammad Raman Moloudi محمد رامان مولودی 5400319475328460015307 5400319475328460015307 No Liver & Digestive Research Center, Kurdistan University of Medical Sciences, Sanandaj, Iran. مرکز تحقیقات گوارش و کبد، دانشگاه علوم پزشکی کردستان، سنندج، ایران Maryam Bigdelo مریم بیگدلو 5400319475328460015308 5400319475328460015308 No MSc Molecular biology, Department of Biological Sciences, Faculty of Sciences, University of Kurdistan, Sanandaj, Iran. کارشناسی ارشد زیست شناسی سلولی-مولکولی، گروه علوم زیستی، دانشکده علوم، دانشگاه کردستان، سنندج، ایران. Arman Rahimi آرمان رحیمی 5400319475328460015309 5400319475328460015309 No MSc Molecular biology, Department of Biological Sciences, Faculty of Sciences, University of Kurdistan, Sanandaj, Iran. کارشناسی ارشد زیست شناسی سلولی-مولکولی، گروه علوم زیستی، دانشکده علوم، دانشگاه کردستان، سنندج، ایران.