Scientific Journal of Kurdistan University of Medical Sciences

fa شناسایی گونه‌های مالاسـزیا در مبتلایان به پیتیریازیس ورسیکالر با روش مولکولی PCR-RFLP Identification of Malassezia species using PCR-RFLP molecular method in the patients with pityriasis versicolor عمومى General پژوهشي اصیل Original Research زمینه و هدف: مالاسزیاها، مخمرهایی هستند که در شرایط خاص به  عواملی بیماری زا در انسان تبدیل میشوند. مالاسزیاها دارای گونه های مختلفی بوده و می توانند بیماری هایی نظیر پیتیریازیس ورسیکالر(تینه آورسیکالر)، فولیکولیت مالاسزیایی، درماتیت سبوروئیک و حتی عفونت های سیستمیک را ایجاد کنند. در مطالعه حاضر، مالاسزیاهای جدا شده از مبتلایان به پیتیریازیس ورسیکالر با روش مولکولی شناسایی شدند. روش بررسی: در این مطالعه، پوسته های سر و بدن مبتلایان مشکوک به پیتیریازیس ورسیکالر بر روی محیط کشت دیکسون آگار کشت داده شده و در نهایت 100 کلنی مالاسزیایی بدست آمد. ژنوم کلنی های مالاسزیاها پس از استخراج توسط روش فنل کلروفرم، بر اساس روش مولکولی PCR-PFLP مورد مطالعه قرار گرفتند. در این روش، قطعه D1-D2 در ناحیهی  26S rDNA از ژن  ITS توسط پرایمرهای اختصاصی تکثیر گردید و توسط آنزیم محدودالاثر CfoI، قطعات با الگوی های مشخص برای هر گونهی مالاسزیا به دست آمد. یافته ها: ایزوله های مالاسزیا شناسایی شده در نمونه های بالینی به ترتیب دارای 44% مالاسزیا گلوبوزا،27% مالاسزیا گلوبوزا/ مالاسزیا رستریکتا، 11% مالاسزیا رستریکتا، 7% مالاسزیا سیمپودیالیسپ ، 4% مالاسزیا سیمپودیالیس/ مالاسزیا رستریکتا، 1% مالاسزیا فورفور/ مالاسزیا گلوبوزا/ مالاسزیا رستریکتا، 1%  مالاسزیا سیمپودیالیس/ مالاسزیا گلوبوزا/ مالاسزیا رستریکتا بودند. 5% از گونه ها نیز بصورت ناشناخته باقی ماندند. نتیجه گیری: گونه های غالب مبتلایان به پیتیریازیس ورسیکالر، به ترتیب مالاسزیا گلوبوزا، مالاسزیا رستریکتا و مالاسزیا سیمپودیالیس بودند. 33 درصد از نمونه ها دارای بیش از یک گونه مالاسزیا بودند، اگر چه روش PCR-RFLP برای شناسایی اغلب گونه های مالاسزیا بود، ولی 5% از ایزوله ها قابل شناسایی نبودند.  کلیـد واژهها: مالاسزیا، پیتیریازیس ورسیکالر،PCR–RFLP وصول مقاله:10/7/95 اصلاحیه نهایی:2/11/95 پذیرش:23/11/95 Background and Aim: Malassezia yeast can become pathogenic under certain conditions in humans. Malassezia has various species which can cause a number of skin diseases, such as pityriasis versicolor (tinea versicolor), seborrheic dermatitis and folliculitis and even systemic infections. In the present study, Malassezia species isolated from the patients with pityriasis versicolor were identified by PCR-PFLP molecular method. Material and Methods: In this study, the scraping specimens of the trunk and scalp of the patients with pityriasis versicolor were cultured on Dixon agar medium. Finally, one-hundred Malassezia colonies were obtained. The genomic DNA was extracted by phenol–chloroform method and then was studied by use of PCR-PFLP molecular method. D1-D2 segment in the area of 26srDNA of ITS gene was proliferated by specific primers and then the PCR products were exposed to CfoI restrictive enzyme. Results: Among 100 Malassezia colonies, the most common Malassezia species were; M. globosa (44%), M. globosa/M. restricta (27%), M. restricta (11%), M. sympodialis (7%), M. sympodialis/M. restricta (4%), M. globosa/M. restricta/M. furfur (1%), M. sympodialis/M. restricta/ M. globosa (1%) and unknown species (5%). Conclusion: The dominant species isolated from patients with pityriasis versicolor were M. globosa, M. restricta and M. sympodialis, respectively. Thirty-three percent of the specimens had more than one Malassezia species. Therefore, rapid PCR-RFLP method is recommended for identification of Malassezia species in epidemiological studies and production of more effective medicines. Key words: Malassezia; Pityriasis versicolor; PCR-RFLP.   Received: Oct 1, 2016      Accepted: Feb 11, 2017 مالاسزیا, پیتیریازیس ورسیکالر,PCR–RFLP Malassezia, Pityriasis versicolor, PCR-RFLP 85 93 http://sjku.muk.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-25-156&slc_lang=fa&sid=1 Seyed Mehdi Hosseini Bafghi سید مهدی حسینی بافقی 5400319475328460014628 5400319475328460014628 No Islamic Azad University, Tehran science and research branch, Tehran, Iran. دانشگاه آزاد اسلامی، واحد علوم و تحقیقات تهران، ایران. Noor Amir Mozafari نور امیر مظفری 5400319475328460014629 5400319475328460014629 No Department of Microbiology, Iran University of Medical Sciences, Tehran, Iran. دانشگاه علوم پزشکی ایران، تهران. Abdolmajid Fata عبدالمجید فتی 5400319475328460014630 5400319475328460014630 No Department of Parasitology and Mycology, School of Medicine, Mashhad University of Medical Sciences, Mashhad, Iran. گروه انگل شناسی و قارچ ‌شناسی پزشکی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی مشهد، مشهد. Ali Naseri علی ناصری 5400319475328460014631 5400319475328460014631 No Department of Parasitology and Mycology, School of Medicine, Mashhad University of Medical Sciences, Mashhad, Iran. گروه انگل شناسی و قارچ ‌شناسی پزشکی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی مشهد، مشهد. Hossein Zarrinfar حسین زرین فر Zarrinfarh@mums.ac.ir 5400319475328460014632 5400319475328460014632 Yes Allergy research center, School of Medicine, Mashhad University of Medical Sciences, Mashhad, Iran مرکز تحقیقات آلرژی، دانشگاه علوم پزشکی مشهد، مشهد، ایران