فریده دین محمدی ، دكتر پریسا فرنیا، دكتر علیرضا بیگلری ، مهدی کاظم پور ، دكتر رشید رمضان زاده، دكتر محمد رضا مسجدی، دكتر علی اکبر ولایتی ،
دوره ۱۴، شماره ۴ - ( ۱۲-۱۳۸۸ )
چکیده
چکیده
زمینه و هدف: ایزونیازید یکی از داروهای مهم خط اول درمان سل می‌باشد. مقاومت به این دارو در بسیاری از نقاط جهان رو به افزایش است. جهش‌های ایجاد شده در ژنKatG و inhA در اغلب موارد عامل مقاومت به ایزونیازید می‌باشند. هدف از این مطالعه ارائه روشی مناسب و سریع برای شناسایی موتاسیونهای مرتبط با مقاومت به ایزونیازید در مایکوباکتریوم توبرکلوزیس می‌باشد.
روش بررسی: در این مطالعه وجود جهش در نواحی خاصی از ژنهای katG وinhA در۹۰ نمونه کشت مثبت بیماران مسلول ریوی پس از انجام تست‌های حساسیت داروئی بررسی شد. برای تعیین جهش‌های کدون ۳۱۵ KatG از تکنیکPCR-RFLP استفاده گردید. محصول PCR حاصل از تکثیر این قطعه ژنی (bp۶۲۰) توسط آنزیم محدودالاثر MspI برش داده شد. برای شناسائی جهش در ژن inhA نیز از تکنیک MAS-PCR استفاده شد.
یافته‌ها: ۵/۳۴% درصد از نمونه‌های مقاوم به ایزونیازید فنوتیپ Thr۳۱۵ و ۵/۶۵% از نمونه‌های مقاوم فنوتیپ Ser۳۱۵ را نشان دادند. اختصاصیت Thr۳۱۵ برای نمونه‌های مقاوم ۱۰۰% می‌باشد. همچنین در این مطالعه از ۵۲ نمونه مقاوم به ایزونیازید ۶/۳۴% در کدون ۴۶۳ دارای اسیدآمینه Arg و ۴/۶۵% دارای اسیدآمینه Leu بودند. فراوانی جهش در لوکوس (۱۵C →T-)inhA نمونه‌های MDR و غیرMDR به ترتیب ۲۰% و ۷/۱۶% درصد بود.
نتیجه‌گیری: با استفاده از روش PCR-RFLP (آنزیم MSPI) و MAS PCR جهش‌های ایجاد شده در کدون ۳۱۵ ژن KatG و ناحیه پروموتورinhA شناسایی می‌شوند. این روشها علاوه بر سادگی و ارزان بودن نسبت به روشهای دیگر در مدت زمان کمتری نتایج دقیق و مطمئنی را فراهم می‌آورند.
کلید واژه‌ها: مایکوباکتریم توبرکلوزیس، مقاومت به ایزونیازید،PCR-RFLP، KatG،inhA ،MAS PCR
وصول مقاله: ۹/۱۰/۸۸ اصلاح نهایی: ۱۶/۱۰/۸۸ پذیرش مقاله: ۱۷/۱۱/۸۸
