fa مقایسه اثرات آپوپتوتیک و سایتوتوکسیک عصاره Astragalus hamosus با پاکلیتاکسل در مدل کشت دو بعدی و سه بعدی سلول‌های اندوتلیال ورید نافی انسان عمومى General پژوهشي اصیل Original Research <span style="font-size:10pt"><span style="line-height:normal"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" style="font-family:" zar="">زمینه و هدف:</span></span></b><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" style="font-family:" zar=""> رگ‌زایی برای متاستاز و رشد تومورهای جامد لازم است؛ زیرا اکسیژن و مواد غذایی را برای تومور فراهم می‌کند. اثر ضد رگ‌زایی یکی از مهم‌ترین مکانیسم‌های دارویی در درمان سرطان است و بسیاری از داروهای دارای اثر ضد رگ‌زایی شناسایی شده‌اند. با در نظر گرفتن فعالیت ضد توموری با مکانیسم مشابهی که در گیاه دارویی ناخنک (</span></span><i>Astragalus hamosus</i><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" style="font-family:" zar=""> با نام اختصاری </span></span>(<i>A. hamosus</i>)<span style="font-size:12.0pt"><span b="" style="font-family:" zar=""> شناسایی شده است، اثرات سایتوتوکسیک و آپوپتوتیک این گیاه بر روی سلول‌های اندوتلیال ورید نافی انسان </span></span>(HUVEC) <span style="font-size:12.0pt"><span b="" style="font-family:" zar="">&nbsp;در یک مدل ژل فیبرین سه بعدی در مقایسه با مدل کشت دو بعدی در این مطالعه مورد بررسی قرار گرفته است.</span></span></span></span></span></span></span><br> <span style="font-size:10pt"><span style="line-height:normal"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" style="font-family:" zar="">مواد و روش‌ها: </span></span></b><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" style="font-family:" zar="">عصاره‌ی ناخنک</span></span> <span lang="AR-SA" style="font-size:12.0pt"><span b="" style="font-family:" zar="">جهت تست سمیت سلولی بر روی </span></span>HUVEC<span lang="AR-SA" style="font-size:12.0pt"><span b="" style="font-family:" zar=""> با استفاده از </span></span><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" style="font-family:" zar="">آنالیز </span></span>MTT<span style="font-size:12.0pt"><span b="" style="font-family:" zar=""> مورد بررسی قرار گرفت. فلوسایتومتری برای بررسی آپوپتوز، چرخه سلولی و تکثیر سلولی استفاده شد. همچنین با استفاده از آزمایش ریل‌تایم، بیان ژن‌های مرتبط با آپوپتوز مانند کاسپازهای 3، 8 و 9 و همچنین </span></span>Bcl-2<span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" style="font-family:" zar=""> ارزیابی شد.</span></span></span></span></span></span></span><br> <span style="font-size:10pt"><span style="line-height:normal"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" style="font-family:" zar="">یافته‌ها:</span></span></b><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" style="font-family:" zar=""> بقا و تکثیر سلول‌های </span></span>HUVEC<span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" style="font-family:" zar=""> بعد از تیمار با غلظت </span></span>IC₅₀<span style="font-size:12.0pt"><span b="" style="font-family:" zar=""> عصاره‌ی ناخنک</span></span> <span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" style="font-family:" zar="">به طور قابل ملاحظه‌ای کاهش پیدا کرد. آنالیز فلوسایتومتری نشان داد که چرخه‌ی سلولی در </span></span>HUVEC<span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" style="font-family:" zar=""> در فاز </span></span>G0/G1<span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" style="font-family:" zar=""> در مدل سه بعدی بیشتر از مدل دو بعدی متوقف شد. فعالیت ضد تکثیر سلولی عصاره، بیان </span></span>Ki-67<span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" style="font-family:" zar=""> را بخصوص در کشت سه‌بعدی کاهش داد. همچنین بعد از تیمار با عصاره‌ی ناخنک، سطوح آپوپتوز در مدل کشت سه‌بعدی در مقایسه با مدل کشت دو بعدی افزایش پیدا کرد که این امر توسط فلوسایتومتری و ریل‌تایم تائید شد<i>.</i></span></span></span></span></span></span></span><br> <span style="font-size:10pt"><span style="line-height:normal"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" style="font-family:" zar="">نتیجه‌گیری: </span></span></b><span lang="FA" style="font-size:12.0pt"><span b="" style="font-family:" zar="">بر اساس نتایج، عصاره‌ی ناخنک می‌تواند با اعمال اثرات سایتوتوکسیک و آپوپتوتیک با جلوگیری از تکثیر سلول‌های عروقی جهت درمان تومور استفاده شود. همچنین، ژل فیبرین سه‌بعدی می‌تواند خصوصیات ضد تکثیر سلولی و ضد آپوپتوزی تومورها را بهتر از محیط کشت دو بعدی شبیه سازی کند.</span></span></span></span></span></span></span><br> &nbsp; <span style="font-size:10pt"><span style="line-height:normal"><span style="unicode-bidi:embed"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b><span style="font-size:12.0pt">Background and aim:</span></b><span style="font-size:12.0pt"> Angiogenesis is necessary for solid tumors to grow and metastasize because it provides oxygen and nutrients for the tumors. Many drugs have been identified for anti-angiogenic therapy, which is one of the most important drug mechanisms in cancer treatment. Considering similar anti-tumor activity by a similar mechanism in a herbal medicine, <i>Astragalus hamosus </i>(<i>A. hamosus</i>) we compared </span><span style="font-size:12.0pt">apoptotic and cytotoxic</span><span style="font-size:12.0pt"> effects of this herbal medicine on human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) between a 3D fibrin gel model&nbsp; and a 2D culture model.</span></span></span></span></span><br> <span style="font-size:10pt"><span style="line-height:normal"><span style="unicode-bidi:embed"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b><span style="font-size:12.0pt">Materials and Methods:</span></b><span style="font-size:12.0pt"> <i>A. hamosus</i> extract was tested for its&nbsp;&nbsp; cytotoxicity on HUVECs using MTT assay. Flow cytometry was used to examine apoptosis, cell cycle, and proliferation. Also, by qPCR, we assessed the expression of genes related to apoptosis, such as caspase-9, -8, -3, and Bcl-2.</span></span></span></span></span><br> <span style="font-size:10pt"><span style="line-height:normal"><span style="unicode-bidi:embed"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b><span style="font-size:12.0pt">Results: </span></b><span style="font-size:12.0pt">Angiogenic activities of HUVECs were significantly decreased after treatment with IC₅₀ concentration of <i>A. hamosus</i> extract. Flow cytometry analysis revealed that cell cycle arrest in G0/G1 phase in HUVECs in the 3D model higher than in 2D culture. Anti-proliferation activity of the extract decreased the expression of Ki-67, especially in the 3D culture. Also, after <i>A. hamosus </i>treatment, apoptosis level increased in the 3D culture model compared to that in the 2D culture which was confirmed by flow cytometry and qPCR.</span></span></span></span></span><br> <span style="font-size:10pt"><span style="line-height:normal"><span style="unicode-bidi:embed"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b><span style="font-size:12.0pt">Conclusion:</span></b><span style="font-size:12.0pt"> Based on our results, <i>A. hamosus</i> extract can be used to treat tumors by inhibiting angiogenesis. Also, 3D fibrin gel can simulate anti-proliferative and anti-apoptotic properties of tumors better than 2D culture.</span></span></span></span></span><br> <br> <br> &nbsp; ناخنک, رگ‌زایی, آپوپتوز, پاکلیتاکسل Astragalus hamosus, Angiogenesis, Apoptosis. 9 21 http://sjku.muk.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1340-3&slc_lang=fa&sid=1 mozaffar mahmoodi مظفر محمودی mzffrmahmoodi@gmail.com 5400319475328460061301 5400319475328460061301 Yes Department of Molecular Medicine and Medical Biotechnology, School of Medicine, Kurdistan University of Medical Sciences, Sanandaj, Iran گروه پزشکی مولکولی و بیوتکنولوژی پزشکی، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی کردستان، سنندج، ایران Golara nasiri گل آرا نصیری gol.nasiri@gmail.com 5400319475328460061302 5400319475328460061302 No Department of Tissue Engineering and Applied Cell Sciences, School of Advanced Technologies in Medicine, Shiraz University of Medical Sciences, Shiraz, Iran گروه مهندسی بافت و علوم سلولی کاربردی، دانشکده علوم و فناوری‌های نوین پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شیراز، شیراز، ایران