fa بررسی ایمنی حفاظتی لیپوپلی ساکارید و فرکشن پروتئینی لژیونلا پنوموفیلا در مواجهه با دوز کشنده این باکتری در موش عمومى General پژوهشي اصیل Original Research چکیده زمینه و هدف: لژیونلا پنوموفیلا عامل بیماری لژیونر بوده که می‌تواند کشنده باشد و تا به حال واکسنی برای آن تهیه نشده است. همچنین آنتی ژنهای این باکتری محرک سیستم ایمنی هستند. هدف از این مطالعه مقایسه ایمنی‌زایی لیپوپلی ساکارید و فرکشن پروتئینی لژیونلا پنوموفیلا در مواجهه با دوز کشنده این باکتری در مدل موشی است. روش بررسی: پس از کشت انبوه باکتری، لیپوپلی ساکارید و فرکشن پروتئینی این باکتری با روش فنل داغ و تیمار آنزیمی به دست آمد. الکتروفورز بر روی ژل پلی اکریلامید برای لیپو پلی ساکارید و فرکشن پروتئینی انجام شد. برای تهیه واکسن از لیپو پلی ساکارید و فرکشن پروتئینی، ١٠ میکروگرم از هر آنتی ژن در ٥/٠ میلی‌لیتر محلول سالین حل و برای تزریق آماده شد. ۶ گروه موش ماده نوع BALB/c (هر گروه دارای 15 موش) انتخاب شدند. ٤ گروه از موش‌ها به صورت تزریق داخل صفاقی و سه دوز با فواصل دو هفته‌ای مورد واکسیناسیون قرار گرفتند. به دو گروه دیگر به عنوان شاهد فقط نرمال سالین تزریق شد. دو هفته پس از آخرین واکسیناسیون، به دو گروه از موش‌های واکسینه شده و یک گروه شاهد، دوز کشنده باکتری ((LD100 تزریق شد. همچنین شش هفته پس از آخرین واکسیناسیون، دو گروه دیگر واکسینه شده و گروه شاهد مورد مواجهه قرار گرفتند. یافته‌ها: نتایج مواجهه با دوز کشنده باکتری اول نشان داد که تأثیر ایمنی‌زایی فرکشن پروتئینی و لیپوپلی ساکارید به ترتیب 66/86% و ٣٣/٧٣% و شش هفته پس از آخرین ایمونیزاسیون 66/86% برای فرکشن پروتئینی و ٦٠% برای لیپو پلی ساکارید می‌باشد. نتیجه‌گیری: این مطالعه نشان داد که فرکشن پروتئینی و لیپوپلی ساکارید لژیونلا پنوموفیلا دارای ایمنی حفاظتی مناسبی بوده و گزینه‌هایی برای مطالعات تولید واکسن می‌باشند. کلید واژه‌ها: لژیونلا پنوموفیلا، ایمنی‌زایی، لیپوپلی ساکارید، فرکشن پروتئینی وصول مقاله: 4/11/89 اصلاحیه نهایی: 4/3/90 پذیرش مقاله: 17/3/90 ABSTRACT Background and Aim: Legionella pneumophila is the cause of legionellosis disease that can be fatal. Yet, no vaccine has been available for this infection. Also antigens of these bacteria can stimulate the immune system. The purpose of this study was to compare the immunogenic effect of lipopolysaccharide fraction with that of protein fraction of Legionella pneumophila in challenging with lethal dose of these bacteria in mice. Material and Methods: After preparation of bacterial biomass, LPS and protein fractions were separated by hot phenol method and precipitated by enzyme digestion. LPS and protein fraction electrophoresis on poly acrylamide gel was performed. For preparation of vaccines from LPS and protein fractions, 10µg of each antigen was solved in 0.5 ml of normal saline and used for injection. Six groups of female BALB/c mice (each group consisted of 15 mice) were selected. Four groups of mice were vaccinated by intraperitoneal (i.p) injections at fortnightly intervals for three times. The two control groups of mice received normal saline injections. Two weeks after the last immunization, two groups of vaccinated mice and one control group were challenged with LD100 of the virulent strain of L. pneumophila. Also six weeks after the last immunization the other three groups (2 vaccinated and one control groups) were challenged. Result: The results of the first challenge showed the immunogenic efficiency gains of 86.66% and 73.33% for protein fraction and LPS respectively, and after six weeks of the last immunization the immunogenic efficiency gains were 60% for LPS and 86.66% for protein fractions. Conclusion: This study showed that the protein fraction and LPS of L.pneumophila have high immunogenic activity and can be proper candidates for vaccine studies. Key words: Legionella pneumophila, Immunization, Protein fraction, LPS Conflict of Interest: Nill Received: Jan 24, 2011 Accepted: Jun 7, 2011 لژیونلا پنوموفیلا، ایمنی‌زایی، لیپوپلی ساکارید، فرکشن پروتئینی Legionella pneumophila, Immunization, Protein fraction, LPS 20 30 http://sjku.muk.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-300&slc_lang=fa&sid=1 Yousef Motaharinia یوسف مطهری نیا 540031947532846002382 540031947532846002382 Yes Medicine Faculty, Zanjan University of Medical Sciences دانشکده علوم پایه و پزشکی دانشگاه آزاد اسلامی واحد زنجان Reza Shapouri رضا شاپوری 540031947532846002383 540031947532846002383 No Medicine Faculty, Zanjan University of Medical Sciences دانشکده علوم پایه و پزشکی دانشگاه آزاد اسلامی واحد زنجان Mehdi Rahnema مهدی رهنما 540031947532846002384 540031947532846002384 No Medicine Faculty, Zanjan University of Medical Sciences دانشکده علوم پایه و پزشکی دانشگاه آزاد اسلامی واحد زنجان Mohammad Reza Rahmani محمد رضا رحمانی 540031947532846002385 540031947532846002385 No Kurdistanj University of Medical Sciences دانشگاه علوم پزشکی کردستان Mohammad Ali Rezaie محمد علی رضایی 540031947532846002386 540031947532846002386 No Kurdistanj University of Medical Sciences دانشگاه علوم پزشکی کردستان