fa بررسی بیان ژن پمپ افلاکس marA در سویه‌های بالینی سالمونلا انتریتیدیس مقاوم به سیپروفلوکساسین با استفاده از Real Time PCR عمومى General پژوهشي اصیل Original Research <div style="text-align: justify;"><strong><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">زمینه و هدف: </span></span></strong><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">سویه&shy;&nbsp; های مقاوم به سیپروفلوکساسین <em>سالمونلا انتریتیدیس</em> یکی از مهم‌ترین عوامل عفونت‌زای انتقال&shy; دهنده از راه مواد غذایی</span></span><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> می‌باشند، به طوری که پمپ افلاکس </span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">marA</span></span></span></em><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> در این باکتری نقش بسزایی در ایجاد مقاومت به سیپروفلوکساسین دارد. هدف از این مطالعه</span></span> <span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">بررسی بیان ژن پمپ افلاکس </span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">marA</span></span></span></em><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> در سویه ‌های بالینی <em>سالمونلا انتریتیدیس</em> مقاوم به سیپروفلوکساسین</span></span> <span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">با استفاده از روش </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">Real Time PCR</span></span></span> <span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">&nbsp;است.</span></span><br> <strong><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">مواد و روش &shy;ها:</span></span></strong> <span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">در این مطالعه توصیفی-مقطعی، سویه‌های <em>سالمونلا</em> <em>انتریتیدیس </em>از </span></span><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">نمونه بالینی مدفوع با استفاده از روش‌های میکروبی جداسازی </span></span><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">شد و مقاومت آنتی‌بیوتیکی سویه ‌های مقاوم به سیپروفلوکساسین با روش دیسک دیفیوژن بررسی شد.</span></span> <span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">سپس وجود پمپ افلاکس </span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">marA</span></span></span></em><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> در سویه بالینی <em>سالمونلا انتریتیدیس</em></span></span><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> مقاوم و حدواسط به</span></span> <span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">سیپروفلوکساسین </span></span><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">با روش کارت ویل و </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">PCR</span></span></span><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> بررسی شد.</span></span> <span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">هم چنین بیان ژن </span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">marA</span></span></span></em><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> در سویه&shy;&nbsp; های <em>سالمونلا</em> <em>انتریتیدیس</em> با استفاده از روش </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">Real Time PCR</span></span></span><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> مورد بررسی قرار گرفت. در انتها، نتایج این مطالعه با استفاده از نرم افزار </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">SPSS</span></span></span><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> نسخه 21</span></span> <span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">و روش آماری آنالیز واریانس یک طرفه (</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">One-way ANNOVA</span></span></span><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">) تحلیل گردید.</span></span><br> <strong><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">یافته‌ها:</span></span></strong> <span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">از میان</span></span> <span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">1200 نمونه بالینی مدفوع، 60</span></span> <span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">نمونه</span></span><em><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> سالمونلا</span></span></em><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> <em>انتریتیدیس</em> </span></span><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">جداسازی</span></span> <span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">شد </span></span><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">که </span></span><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">بیشترین</span></span> <span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">مقاومت مربوط به</span></span> <span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">سیپروفلوکساسین </span></span><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">9 سویه (15</span></span><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">%</span></span><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">) </span></span><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">و 11 سویه حد واسط (18%) و کمترین مقاومت به ایمی پنم وکلرامفنیکل (100%) حساس</span></span> <span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">بودند. </span></span><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">نتایج روش کارت ویل و </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">PCR</span></span></span><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> نشان داد که از میان 20 سویه&shy; مقاوم و حد واسط به سیپروفلوکساسین،</span></span> <span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">تمامی آن‌ها دارای</span></span> <span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">ژن پمپ افلاکس </span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">marA</span></span></span></em><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> بودند.</span></span> <span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">به دنبال آن،</span></span> <span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">بیان ژن پمپ افلاکس </span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">marA</span></span></span></em> <span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">در سویه&shy; های</span></span><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> مقاوم و حد واسط به سیپروفلوکساسین</span></span><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> افزایش معنی&shy;داری داشته است (0/05&nbsp;</span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">P<</span></span></span><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">).</span></span><br> <strong><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">نتیجه&shy; گیری:</span></span></strong><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> بر پایه نتایج </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">Real Time PCR</span></span></span><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">،</span></span> <span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">ژن پمپ افلاکس </span></span><em><span dir="LTR"><span style="font-family:Times New Roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">marA</span></span></span></em><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> به عنوان یکی از عوامل مقاومت</span></span> <em><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;">سالمونلا انتریتیدیس</span></span></em><span style="font-family:B Zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> مقاوم به سیپروفلوکساسین است.</span></span></div> <div style="text-align: justify;"><strong>Background and </strong><strong>Aim</strong><strong>:</strong> Ciprofloxacin-resistant Salmonella spp. are among the most important causative agents of food-borne infections. The <em>marA</em> efflux pump in this bacterium plays a significant role in the development of drug resistance. The aim of this study was to investigate <em>marA</em> efflux pump gene expression in Ciprofloxacin resistant <em>Salmonella enteritidis</em> clinical strains by Real Time PCR.<br> <strong>Materials and Methods:</strong> In this cross-sectional study, strains of <em>Salmonella enteritidis</em> were isolated from clinical specimens of feces using microbial methods. Antibiotic resistance of ciprofloxacin-resistant strains was evaluated by disk diffusion method. The presence of <em>marA </em>efflux pump in the clinical strain of <em>Salmonella</em> <em>enteritidis</em>, intermediate ciprofloxacin-resistant, was evaluated using Cart-wheel and PCR. The results of this study were analyzed using SPSS 21 software and one-way ANOVA.<br> <strong style="white-space: pre-wrap;">Results:</strong><span style="white-space: pre-wrap;"> From the 1200 fecal clinical specimens, 60 </span><em style="white-space: pre-wrap;">Salmonella</em><span style="white-space: pre-wrap;"> </span><em style="white-space: pre-wrap;">enteritidis</em><span style="white-space: pre-wrap;"> were isolated. The highest resistance was related to 9 strains (15%) and 11 intermediate strains (18%) ciprofloxacin. and the least resistance was related to imipenem and chloramphenicol (100% sensitive). The results of cartwheel and PCR methods showed that all strains intermediate or resistant to ciprofloxacin had a </span><em style="white-space: pre-wrap;">marA</em><span style="white-space: pre-wrap;"> efflux pump. Finally, Real-Time PCR results showed a significant up-regulation of </span><em style="white-space: pre-wrap;">marA</em><span style="white-space: pre-wrap;"> gene in </span><em style="white-space: pre-wrap;">S</em><span style="white-space: pre-wrap;">. </span><em style="white-space: pre-wrap;">enteritidis</em><span style="white-space: pre-wrap;"> strains. </span><br> <strong>Conclusion:</strong> According to the results of Real-Time PCR, it seems that the<em> marA</em> efflux pump gene is one of the resistance agents in ciprofloxacin-resistant <em>Salmonella enteritidis.</em></div> <pre> </pre> سالمونلا انتریتیدیس, پمپ افلاکس, marA, Real Time PCR Salmonella enteritidis, Efflux Pump, marA, Real Time PCR 14 26 http://sjku.muk.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-358-12&slc_lang=fa&sid=1 Marjan Khosravani مرجان خسروانی marjan.khosravani@yahoo.com 5400319475328460034340 5400319475328460034340 No Department of Microbiology, Fars Science and Research Branch, Islamic Azad University, Fars, Iran گروه میکروبیولوژی، واحد علوم و تحقیقات فارس، دانشگاه آزاد اسلامی، فارس، ایران. Mohammad Mehdi Soltan Dallal محمد مهدی سلطان دلال msoltandallal@gmail.com 5400319475328460034341 5400319475328460034341 Yes Divison of Microbiology, Department of Pathobiology, School of Public Health, Tehran University of Medical Science, Tehran, Iran بخش میکروب شناسی، گروه پاتوبیولوژی، دانشکده بهداشت، دانشگاه علوم پزشکی تهران، تهران، ایران Mehdi Norouzi مهدی نوروزی msoltandallal@gmail.com 5400319475328460034342 5400319475328460034342 No Department of Virology, School of Public Health, Tehran University of Medial Science, Tehran, Iran گروه ویروس شناسی، دانشکده بهداشت، دانشگاه علوم پزشکی تهران، تهران، ایران