fa اثرات سایتوتوکسیک و آپوپتوتیک مهارکننده نوروکینین-1 رسپتور (NK1R) بر سلول-های مالتیپل میلوما عمومى General پژوهشي اصیل Original Research <strong><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;">زمینه و هدف: </span></span></strong><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;">با وجود پیشرفت‌&shy;های درمانی در دهه&shy;‌های اخیر، مالتیپل میلوما </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">(MM)</span></span></span><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> همچنان یکی از دلایل مهم مرگ و میر در جهان است. بر اساس مطالعات قبلی که بیانگر نقش </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">Neurokinin-۱Receptor (NK۱R)</span></span></span><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> در پاتوژنز سرطان&shy;‌ها بوده است، تصمیم گرفتیم تا اثرات سایتوتوکسیک و آپوپتوتیک </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">Aprepitant</span></span></span><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> (آنتاگونیست </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">NK۱R</span></span></span><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;">) را در رده سلولی </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">KMM-۱</span></span></span><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> (مشتق از </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">MM</span></span></span><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;">) بررسی کنیم.</span></span><br> <strong><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;">مواد و روش‌&shy;ها:</span></span></strong><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> در این</span></span> <span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;">مطالعه</span></span> <span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;">تجربی، برای بررسی اثرات سایتوتوکسیک </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">Aprepitant</span></span></span><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> در مالتیپل میلوما، رده سلولی </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">KMM-۱</span></span></span><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> (تهیه‌&shy;شده از دانشگاه تربیت مدرس) با دوزهای مختلف مهار کننده (۵، ۱۵،۳۰ و ۴۵ میکرومولار) تیمار گشته و سپس درصد زنده‌&shy;مانی، شمارش سلولی، فعالیت متابولیک و القاء آپوپتوز به ترتیب با استفاده از تریپان بلو، </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">MTT</span></span></span><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> و رنگ آمیزی </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">Annexin/PI</span></span></span><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> بررسی گردید. علاوه بر این، آنالیز بیان ژن&shy; به کمک روش </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">Real-time PCR</span></span></span><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> جهت تعیین مکانیسم مولکولی عملکرد </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">Aprepitant</span></span></span><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> در سلول&shy;‌های </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">KMM-۱</span></span></span><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> انجام شد.</span></span><br> <strong><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;">یافته‌&shy;ها: </span></span></strong><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;">نتایج نشان داد که مهار </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">NK۱R</span></span></span><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> با استفاده از </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">Aprepitant</span></span></span><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> موجب مهار رشد سلول&shy;‌های </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">KMM-۱</span></span></span><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> می&shy;شود. همچنین دریافتیم که اثرات سایتوتوکسیک دارو ناشی از توقف سلول&shy;‌ها در فاز </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">G۱</span></span></span><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> و القاء آپوپتوز است؛ چرا که درصد سلول&shy;‌های رنگ گرفته با </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">Annexine/PI</span></span></span><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> در سلول&shy;‌های تیمار&shy;شده افزایش یافته بود </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">(P<۰.۰۵)</span></span></span><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;">. همچنین، نتایج </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">Real-time PCR</span></span></span><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> نشان داد که </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">Apreptant</span></span></span><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> نسبت بیان ژن&shy;‌های پروآپوپوتیک به آنتی‌&shy;آپوپتوتیک را از طریق تغییر بیان </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">Bax</span></span></span><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> و </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">Bcl-۲</span></span></span><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> تغییر می&shy;‌دهد.</span></span><br> <strong><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;">نتیجه&shy;‌گیری: </span></span></strong><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;">در این پژوهش، کارآمدی </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">Aprepitant</span></span></span><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> در سلول&shy;‌های </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">KMM-۱</span></span></span><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> کاملاً مشخص شد؛ با این وجود، برای تضمین بی‌&shy;خطر و مؤثر بودن این دارو در درمان بیماران </span></span><span dir="LTR"><span style="font-family:times new roman,serif;"><span style="font-size:12.0pt;">MM</span></span></span><span style="font-family:b zar;"><span style="font-size:12.0pt;"> نیاز به انجام مطالعات بیشتر در آینده است.</span></span><br> &nbsp; <strong>Background and Aim: </strong>Despite therapeutic improvements in recent decades, multiple myeloma (MM) still remains as one of the leading causes of death all over the world. Previous studies have indicated role of neurokinin-1 receptor (NK1R) in the pathogenesis of cancer. Therefore, we decided to evaluate cytotoxic and apoptotic effects of aprepitant (NK1R antagonist) on MM-derived KMM-1 cell line.<br> <strong>Material and Method: </strong>In this experimental study, for assessment of&nbsp; cytotoxic effect of aprepitant on MM cells, KMM-1 (prepared in Tarbiat Modarres University) were exposed to different concentrations of the inhibitor (5,15, 30 and 45 &micro;M) and subsequently viability, cell count, metabolic activity, and induction of apoptosis were investigated using trypan blue, MTT, and annexin/PI staining assays respectively. Moreover, in order to examine the molecular mechanism of action of aprepitant in KMM-1 cells, gene expression analysis was performed by real-time PCR.<br> <strong>Results: </strong>The results indicated that NK1R inhibition using aprepitant resulted in considerable growth suppression of KMM-1 cells. Moreover, we found that the cytotoxic effects were likely due to cell arrest in G1 phase and induction of apoptosis, as revealed by the increased percentage of annexin-V/PI double positive cells among the inhibitor-treated cells (P<0.05). Also, RQ-PCR analysis revealed aprepitant changed the ratio of expression of pro apoptotic to anti apoptotic genes by way of alteration in the expression levels of Bax and Bcl-2 (P<0.05).<br> <strong>Conclusion</strong>: The present study highlighted the efficiency of aprepitant in suppression of the growth of KMM-1 cells; however, further studies are needed to determine the safety and efficacy of this agent for the treatment of MM patients. مالتیپل میلوما, NK1R, Aprepitant, رده سلولیKMM-1 Multiple myeloma, NK1R, Aprepitant, KMM-1 cell line 1 11 http://sjku.muk.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-2283-4&slc_lang=fa&sid=1 Elham Razani الهام رازانی elham.razani.mls@gmail.com 5400319475328460030763 5400319475328460030763 No Department of Hematology and Blood Banking, School of Allied Medical Sciences, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran کارشناسی ارشد خون‌شناسی و بانک خون، گروه خون‌شناسی و بانک‌خون، دانشکده پیراپزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران Davood Bashash داوود بشاش 5400319475328460030764 5400319475328460030764 Yes Department of Hematology and Blood Banking, School of Allied Medical Sciences, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Darband St., Qods Sq., Tehran, I.R.Iran دکترای تخصصی خون‌شناسی و بانک خون، دانشیار گروه خون‌شناسی و بانک خون، دانشکده پیراپزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران