fa بررسی جهش‌های ژن بتا گلوبین در بیماران تالاسمی با استفاده از روش PCR-SSCP عمومى General پژوهشي اصیل Original Research چکیده زمینه و هدف: بتا تالاسمی یکی از شایع ترین بیماری های ژنتیکی در ایران است و بیش از دو میلیون حامل بتا تالاسمی در ایران وجود دارد. شناسایی جهش‌های ژن بتاگلوبین برای برنامه‌های تشخیصی و مدیریتی معین مانند تشخیص پیش از زایمان بیماری بتاتالاسمی ضروری است. در کشور ما روش PCR-ARMS(PCR-amplification refractory mutation system) بطور گسترده برای شناسایی جهش‌های ژن بتا گلوبین استفاده می‌شود. روش بررسی: در این مطالعه کاربرد روش PCR-SSCP (PCR-single strand conformation polymorphism) در شناسایی جهش‌های بتا تالاسمی توضیح داده می‌شود. در بیمارانی که جهش‌های آنها قبلاً با توالی یابی تایید شده بودند، حدود 281 جفت باز حاوی اگزون یک ژن بتا گلوبین با روش PCR تکثیر گردید. 5/2 میکرولیتر محصول واکنش PCRرا مطابق تکنیک SSCP در ژل اکریل آمید الکتروفورز و باندها با رنگ‌آمیزی نیترات نقره آشکار شدند. هفت جهش و یک پلی‌مورفیسم با این تکنیک بررسی شد. یافته‌ها: مشخص گردید الگوی حرکت تک رشته‌ای‌ها کاملاً متفاوت با همدیگر و با نمونه کنترل بود. نتیجه‌گیری: تکنیک PCR-SSCP می‌تواند نیاز ما را برای توالی یابی مستقیم DNA ژنومی کاهش داده و در کشورهای در حال توسعه که بیماریهای هموگلوبینی ژنتیکی بالا و منابع مالی کم است مفید باشد. کلید واژه‌ها: تالاسمی،SSCP، ژن بتا گلوبین وصول مقاله: 22/3/89 اصلاحیه مقاله: 3/8/89 پذیرش مقاله: 20/8/89 ABSTRACT Background and Aim: β-thalassemia (β-thal) is one of the most prevalent hereditary diseases in Iran. There are more than two million carriers of β-thal in Iran. Detection of the beta globin gene mutations is necessary for a definitive diagnostic and management plan such as prenatal diagnosis of β-thalassemia. In our country, the PCR-Amplification Refractory Mutation System (PCR-ARMS) has been frequently used for detection of beta globin gene mutations. Material and Methods: Here, we used the PCR-single strand conformation polymorphism (PCR-SSCP) assay for detection of mutations of beta globin gene. In the patients with confirmed mutations, we amplified 281base pairs containing exon of one of a beta globin gene by PCR. Based on SSCP technique 2.5 µl of the reaction products appeared in polyacryamide gel electrophoresis and the bands were visualized by silver staining. Seven mutations and one polymorphism were evaluated by PCR-SSCP assay. Results: The results of this study demonstrated that the patterns of mobility of single strands were different from each other and those of control sample. Conclusion: Our study showed the PCR-SSCP technique can meet the need for direct genomic sequencing of DNA and could be applied in the developing countries where financial resources are limited but genetic hemoglobin disorders are highly prevalent. Key words: Thalassemia, SSCP, β- globin gene. Conflict of Interest: Nill Received: June 12, 2010 Accepted: Nov 11, 2010 تالاسمی،SSCP، ژن بتا گلوبین Thalassemia, SSCP, β- globin gene. 13 19 http://sjku.muk.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-250&slc_lang=fa&sid=1 Naser Pooladi ناصر پولادی 540031947532846001611 540031947532846001611 No Azarbaijan University of Tarbiat moallem دانشگاه تربیت معلم آذربایجان Mohammad Ali Hosseinpour Feizi محمد علی حسین پور فیضی pourfeizi@eastp.ir 540031947532846001612 540031947532846001612 Yes Tabriz University دانشگاه تبریز Mehdi Haghi مهدی حقی 540031947532846001613 540031947532846001613 No Islamic Azad University-Ahar Branch دانشگاه آزاد اسلامی - واحد اهر Parvin Azarfam پروین آذرفام 540031947532846001614 540031947532846001614 No Tabriz University دانشگاه تبریز Abbasali Hosseinpour Feizi عباسعلی حسین پور فیضی 540031947532846001615 540031947532846001615 No Tabriz University of Medical Science دانشگاه علوم پزشکی تبریز