Scientific Journal of Kurdistan University of Medical Sciences

fa اثر آپوپتوتیک کیپرولیس بر رده سلولی مالتیپل میلوما KMM-1 از طریق القاء توقف چرخه سلولی در G1 وابسته به افزایش p73 Apoptotic effect of Kyprolis on multiple myeloma KMM-1 cells through p73-mediated induction of G1 cell cycle arrest عمومى General پژوهشي اصیل Original Research زمینه و هدف: با توجه به نقش مهمی که پروتئازوم در پرولیفراسیون و بقاء بسیاری از بدخیمیهای خونی، بویژه مالتیپلمیلوما، ایفا میکند؛ به نظر میرسد که سرکوب این سیستم بهوسیله انواع مختلف مهارگرهای پروتئازوم، بتواند بهعنوان راهکار درمانی مناسب بهعنوان درمانهای جدید در مالتیپلمیلوما مطرح شود. هدف از این مطالعه، بررسی تاثیر داروی جدید و مهارگر برگشتناپذیر پروتئازوم، کیپرولیس، بر میزان زندهمانی سلولهای  KMM-1(رده سلولی مالتیپلمیلوما) میباشد. روشها بررسی: در این مطالعه بهمنظور بررسی اثر کیپرولیس، سلولها در حضور غلظتهای مختلف دارو (150-25 نانومولار) به مدت 24 و 48 ساعت کشت داده شدند و متعاقباً آزمونهای Trypan blue exclusion assay، MTT assay، Flocytometric cell cycle analysis و اندازهگیری تغییرات بیان ژنهای هدف مرتبط با آپوپتوز برای آنها انجام پذیرفت. یافته ها: نتایج نشان دادند که کیپرولیس دارای هر دو اثر کشندگی و آنتیپرولیفراتیوی بر رده KMM-1 میباشد. این دارو قادر است تا به صورت وابسته به دوز و زمان از میزان فعالیت متابولیک سلولی بکاهد (001/0>P) و بدین ترتیب میزان زندهمانی سلولهای KMM-1 را کاهش دهد (001/0>P). بهعلاوه، کیپرولیس از طریق افزایش بیان ژن p73 (05/0>P) منجر به افزایش شمار جمعیت سلولها در فاز G1 از چرخه سلولی به میزان 33/52% گردید. از طرف دیگر مواجه سلولهای میلومایی با مهارگر پروتئازوم منجر به القاء آپوپتوز گردید که ممکن است ناشی از تغییر بیان برخی از ژنهای پرو و آنتیآپوپتوتیک باشد (05/0>P). نتیجهگیری: نتایج این مطالعه به طرز آشکاری نشان میدهد که کیپرولیس دارای فعالیت ضدتوموری در سلولهای KMM-1 میباشد. واژههای کلیدی: کیپرولیس، مالتیپلمیلوما، آپوپتوز، مهارگرپروتئازوم، رده سلولی KMM-1، چرخه سلولی وصول مقاله:13/2/96 اصلاحیه نهایی:31/3/96 پذیرش:10/4/96 Background and Aim: Since proteasome is strongly considered to be involved in the development and progression of a wide variety of hematological malignancies in particular, multiple myeloma, blockage of this hemostasis system with different types of proteasome inhibitors seems to be a promising way of treatment for multiple myeloma. In this study, we investigated the effect of Kyprolis, a new irreversible proteasome inhibitor (PI), on the survival rate of multiple myeloma -derived KMM-1 cell line. Material and Methods: To evaluate whether inhibition of proteasome using Kyprolis could exert cytotoxic effect in multiple myeloma, KMM-1 cells were cultured with different concentrations (25-150 nM) of the inhibitor for 24 and 48 hours. Then trypan blue exclusion assay, MTT assay, flocytometric cell cycle analysis were performed and we evaluated gene expression changes associated with apoptosis.   Results: The results of this study demonstrated that Kyprolis induced both cytotoxic and anti-proliferative effects on KMM-1 cells. This inhibitor is able to reduce the cell survival and metabolic activity in a dose- and also time-dependent manner (p ≤ 0.001). Moreover, we found that Kyprolis increased cell population in G1 phase of cell cycle to 52.33% probably through up-regulation of p73 gene expression (p ≤ 0.05). Exposing multiple myeloma cells to this proteasome inhibitor also led to induction of apoptosis probably through alterations in the gene expression of pro- and anti-apoptotic related genes (p ≤ 0.05). Conclusions: The results of this study clearly indicated that Kyprolis had anti-tumor activity against KMM-1 cells. Key words: Kyprolis, Multiple Myeloma, Apoptosis, Proteasome inhibitor, KMM-1 cell line, Cell cycle.   Received: May 3, 2017     Accepted: Jul 1, 2017 کیپرولیس, مالتیپلمیلوما, آپوپتوز, مهارگرپروتئازوم, رده سلولی KMM-1, چرخه سلولی Kyprolis, Multiple Myeloma, Apoptosis, Proteasome inhibitor, KMM-1 cell line, Cell cycle. 21 30 http://sjku.muk.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-25-187&slc_lang=fa&sid=1 Alireza Kazemi علیرضا کاظمی 5400319475328460017034 5400319475328460017034 No Department of Hematology and Blood banking, School of Allied Medicine Sciences, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran. گروه خون‌شناسی و بانک‌خون، دانشکده پیراپزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران Mohammad Reza Sadri محمد رضا صدری 5400319475328460017035 5400319475328460017035 No Department of Hematology and Blood banking, School of Allied Medicine Sciences, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran. گروه خون‌شناسی و بانک‌خون، دانشکده پیراپزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران Ava Safaroghli-Azar آوا صفراوغلی 5400319475328460017036 5400319475328460017036 No Department of Hematology and Blood banking, School of Allied Medicine Sciences, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran. گروه خون‌شناسی و بانک‌خون، دانشکده پیراپزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران Atieh Pourbagheri-Sigaroodi عطیه پورباقری سیگارودی 5400319475328460017037 5400319475328460017037 No Department of Biotechnology, Faculty of Advanced Sciences and Technology, Pharmaceutical Science Branch, Islamic Azad University (IAUPS), Tehran, Iran. گروه بیوتکنولوژی، دانشکده علوم و فناوری‌های نوین، واحد علوم دارویی، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران Mehdi Allahbakhshian-Farsani مهدی اله بخشیان فارسیان 5400319475328460017038 5400319475328460017038 No Department of Hematology and Blood banking, School of Allied Medicine Sciences, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran گروه هماتولوژی و بانک خون، دانشکده پیراپزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران Nader Vazifeh Shiran نادر وظیفه شیران 5400319475328460017039 5400319475328460017039 No Department of Hematology and Blood banking, School of Allied Medicine Sciences, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran گروه هماتولوژی و بانک خون، دانشکده پیراپزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران Davood Bashash داود بشاش d.bashash@sbmu.ac.ir 5400319475328460017040 5400319475328460017040 Yes Department of Hematology and Blood banking, School of Allied Medicine Sciences, Shahid Beheshti University of Medical Sciences, Tehran, Iran گروه هماتولوژی و بانک خون، دانشکده پیراپزشکی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی، تهران، ایران