fa ارزیابی شیوع جهش‌های A2143G، A2142G و A2142C در ایجاد مقاومت به کلاریترومایسین در سویه‌های هلیکوباکتر پیلوری جدا شده از استان چهارمحال و بختیاری عمومى General پژوهشي اصیل Original Research چکیده زمینه و هدف: رژیم‌های درمانی متداول برای ریشه‌کنی هلیکوباکترپیلوری شامل دو آنتی‌بیوتیک، همراه با مهارکننده‌های پمپ پروتونی و ترکیبات بیسموت است. کلاریترومایسین یکی از کلیدی‌ترین آنتی‌بیوتیک‌های مورد استفاده در رژیم‌های درمانی در ایران است. هدف از این پژوهش، تعیین مقاومت به کلاریترومایسین و ارزیابی نقش جهش‌های نقطه‌ای متداولA2143G ، A2142G و A2142C در ایجاد مقاومت به این دارو می‌باشد. روش بررسی: این پژوهش به صورت توصیفی- تحلیلی (مقطعی) بر روی 263 بیمار مراجعه‌کننده به بخش اندوسکوپی بیمارستان هاجر شهرکرد در تابستان 1386 انجام شد. نمونه‌های بیوپسی بر روی محیط انتخابی بروسلا آگار کشت و گرمخانه گذاری گردید. برای تعیین هویت H.pylori از روش رنگ‌آمیزی گرم، اوره آز، کاتالاز، اکسیداز و PCR به منظور شناسایی ژن ureC و برای ارزیابی مقاومت به کلاریترومایسین نیز از روش استاندارد دیسک دیفیوژن CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institue) استفاده گردید. جهش‌های A2143G و A2142G با استفاده از پرایمرهای اختصاصی و آنزیم‌های برش‌دهنده BsaI و MboII با روش PCR-RFLP شناسایی گردید. همچنین برای شناسایی جهش A2142C از پرایمرهای اختصاصی و روش PCR استفاده شد. یافته‌ها: با آزمون PCR، جداسازی 84 سویه H.pylori (94/31%) مورد تایید قرار گرفت. از 19 سویه مقاوم، 13 مورد (42/68%) جهش A2143G، 3 مورد (79/15%) جهش A2142G، 2 مورد جهش A2142C (53/10%) و 1 جهش ناشناخته شناسایی گردید. نتیجه‌گیری: به دلیل میزان مقاومت قابل توجه به کلاریترومایسین، ضرورت ارزیابی مستقیم این جهش با روش‌های مولکولی در سایر مناطق کشور وجود دارد. کلید واژه‌ها: هلیکوباکترپیلوری،کلاریترومایسین، 23SrRNA ،PCR-RFLP.، مقاومت دارویی وصول مقاله: 11/9/88 اصلاحیه نهایی: 12/11/88 پذیرش مقاله: 8/1/89 ABSTRACT Background and Aim: Current therapeutic regimens used for eradication of H.pylori consist of two antibiotics with proton pump inhibitors and bismuth compounds. Clarithromycin is the most important antibiotic used for treatment of H.pylori infection in Iran. The aim of this study was to identify clarithromycin resistance in H.pylori strains and evaluate role of A2143G, A2142G and A2142C of 23SrRNA point mutations in producing resistance to this drug. Material and Methods: This was a cross-sectional study which included 263 patients who had referred to endoscopy department of Hajar hospital, in Shahrekord city, in 2007. Biopsy samples were cultured on brucella agar medium and incubated. For identification of H.pylori gram stain, urease, catalase, oxidase tests were used and PCR method was used to identify Urec gene. Standard method of NCLSI (National Clinical and Laboratory Standards Institute) was used for assessment of clarithromycin resistance. Specific primers and restriction enzymes BsaI and MboII were used to detect A2143G and A2142G mutations by PCR-RFLP method. Also for determination of A2142C mutation, specific primers and PCR method were used. Results: Isolation of 84 strains of H.pylori (31.94%) was confirmed by means of PCR method. Among 19 (22.62%) of clarithromycin resistant strains, 13 (68.40%), 3 (15.78%) and 2 (10.52%) had A2143G, A2142G, A2142C mutations respectively and one unknown mutation was detected in 23SrRNA gene. Conclusion: Because of considerable resistance to clarithromycin, precise diagnosis of this mutation by molecular approach in other parts of the country seems necessary. Key words: H.pylori, clarithromycin, 23SrRNA, PCR-RFLP Conflict of Interest: Nill Received: Nov 2, 2009 Accepted: March 28, 2010 هلیکوباکترپیلوری،کلاریترومایسین، 23SrRNA ،PCR-RFLP.، مقاومت دارویی H.pylori, clarithromycin, 23SrRNA, PCR-RFLP 72 78 http://sjku.muk.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-221&slc_lang=fa&sid=1 Mohammad Kargar محمد کارگر microkargar@gmail.com 540031947532846001275 540031947532846001275 Yes Maryam Baghernejad مریم باقرنژاد 540031947532846001443 540031947532846001443 No Abas Doosti عباس دوستی 540031947532846001444 540031947532846001444 No