fa بررسی فراوانی ایزوله های مایکوباکتریومهای غیر توبرکلوزیس، جدا شده از بیماران مراجعه کننده به مرکز سل دانشگاه علوم پزشکی کاشان عمومى General پژوهشي اصیل Original Research <p dir="RTL"><strong>زمینه و هدف:</strong> امروزه اهمیت بیماریزایی مایکوباکتریوم های غیرکلوزیس&nbsp;<span dir="LTR">(Non-Tuberculosis Mycobacterium)</span>&nbsp;برای انسان مشخص گردیده است. بطور کلی این گروه علاوه بربیماریزایی در دستگاه تنفس، از قدرت بیماریزایی درغدد لنفاوی، پوست، بافت نرم، استخوان ها برخوردار است. تعیین هویت مایکوباکتریاها بر اساس کشت و تستهای بیوشیمیایی هفته ها طول میکشد و درتشخیص قطعی به ما کمک نمی کند. تکنیک<span dir="LTR"> PCR-RFLP (PRA )</span> از ژن <span dir="LTR">hsp65</span> بااستفاده از آنزیمهای <span dir="LTR">HaeIII</span> و <span dir="LTR">BstEII</span> یک روش افتراق گونه ای دقیق بوده و نسبت به روش های فنوتیپی از دقت و سرعت بالاتری برخوردار است. همچنین یک روش سریع و ارزان برای تشخیص گونه های مایکوباکتریایی میباشد.این مطالعه با هدف تعیین فراوانی ایزوله های مایکوباکتریوم غیر توبرکلوزیس ، جدا شده از بیماران مراجعه کننده به مرکز سل انجام شد.</p> <p dir="RTL"><strong>روش بررسی</strong>: مطالعه بر روی 106 بیمار ، مراجعه کننده به مرکز سل دانشگاه علوم پزشکی کاشان، در طول سالهای 91 تا 94 انجام گرفت. ابتدا نمونه ها از نظر وجود تست های تشخیصی بیوشیمیایی مورد آزمون قرار گرفتند. همزمان تعیین هویت آن سویه ها با روش <span dir="LTR">PRA</span> انجام گرفت. سپس قطعه 441 جفت بازی <span dir="LTR">Heat Shock Protein 65 (hsp65)</span> با روش <span dir="LTR">PRA</span> تکثیر شد.سپس محصولات <span dir="LTR">PCR</span> با دو آنزیم <span dir="LTR">HaeIII</span>&nbsp; و <span dir="LTR">BsteII</span> هضم گردید و آنالیز بر اساس الکتروفورز انجام گردید.</p> <p dir="RTL"><strong>یافته ها:</strong> &nbsp;بر اساس آزمایشات مولکولی از میان 106 نمونه بالینی،&nbsp; (8/3%) 4 &nbsp;نمونه خلط مربوط به مایکوباکتریوم های غیر توبرکلوزیس بودند.که شامل یک نمونه <em><span dir="LTR">Mycobacterium abscessus</span></em>، یک نمونه <em><span dir="LTR">Mycobacterium senegalense</span></em>، یک نمونه <em><span dir="LTR">Mycobacterium fortuitum</span></em> و یک نمونه <em><span dir="LTR">Mycobacterium kansasii </span></em>&nbsp;بودند.</p> <p dir="RTL"><strong>نتیجه گیری:</strong> نتایج مطالعه حاضر نشان داد که برخی از موارد بیماری سل در شهر کاشان ناشی از مایکوباکتریوم های غیر توبرکلوزیس می باشد. همچنین استفاده از روش <span dir="LTR">PRA</span> مبتنی بر ژن <em><span dir="LTR">hsp65</span></em> مستقیما بر روی نمونه های بالینی، علاوه بر تسریع تشخیص با تعیین دقیق گونه های <em>مایکوباکتریوم</em> کمک شایانی در تشخیص، درمان و کنترل صحیح بیماری سل می نماید<span dir="LTR">.</span></p> <p dir="RTL"><strong>کلمات کلیدی:</strong> مایکوباکتریوم توبرکلوزیس کمپلکس، مایکوباکتریوم غیر توبرکلوزیس، <span dir="LTR">PRA</span>، <span dir="LTR">hsp65</span></p> <p><span dir="RTL">وصول مقاله:10/5/95 اصلاحیه نهایی:15/6/95 پذیرش:15/6/95</span></p> <p><strong>Background and Aim</strong>: Nowadays, the importance of pathogenicity of non-tuberculosis mycobacteria is well known. Generally, this group, in addition to the respiratory system can cause lymph nodes, skin, soft tissue and bone disorders. Identification of <em>Mycobacterium</em> by culture and biochemical tests may take several weeks and may not be useful for definitive diagnosis. PCR-RFLP (PRA) technique of the <em>hsp65</em> gene using HaeIII and BstEII enzymes is a precise method for species differentiation, in comparison to phenotypic methods. It is a quick and inexpensive method for detection of mycobacterial species. This study aimed to assess the prevalence of non<em>-</em>tuberculous mycobacteria isolated from the patients referring to tuberculosis center (TB) of Kashan University of Medical Sciences.</p> <p><strong>Material and Method</strong>: The study included 106 patients who had been referring to TB Center of Kashan University of Medical Sciences, from 1391 to 1394. The samples were tested by biochemical diagnostic tests. At the same time identification of the strains was made by use of PRA. Amplification of 441-bp fragment was performed by PRA for detection of <em>hsp65</em> gene. The PCR products were digested with HaeIII and BsteII enzymes and analysis was performed on the basis of electrophoresis.</p> <p><strong>Results</strong>: Molecular analysis showed non-tuberculosis mycobacteria in 4(8.3%) sputum samples,i.e. one positive sample (o.9 %) &nbsp;for every one of the following strains: <em>M. abscessus</em>, <em>M. senegalense</em>, <em>M. fortuitum</em> and <em>M.kansasii</em>. &nbsp;</p> <p><strong>Conclusion</strong>: The results of this study showed that some cases of tuberculosis in Kashan are due to non-tuberculosis mycobacteria. Also use of PRA analysis of <em>hsp65</em> gene for clinical specimens is a rapid and useful tool for identification of species of <em>mycobacterium</em> which is helpful for early diagnosis, treatment and control of tuberculosis. &nbsp;</p> <p><strong>Keywords</strong>: <em>Mycobacterium tuberculosis</em> complex, Non-tuberculosis mycobacteria, PCR-RFLP <span dir="RTL">،</span> <em>hsp65.</em> <a name="_GoBack"></a></p> <p></p> <p><strong>Received: </strong>Jul 31, 2016<strong>&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp; Accepted: </strong>Sep 5, 2016</p> مایکوباکتریوم توبرکلوزیس کمپلکس, مایکوباکتریوم غیر توبرکلوزیس, PRA, hsp65 Mycobacterium tuberculosis complex, Non-tuberculosis mycobacteria, PCR-RFLP , hsp65 50 59 http://sjku.muk.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-25-104&slc_lang=fa&sid=1 Mohammad Reza Zilaee محمد رضا ذیلایی mohammadrezazilaee@gmail.com 5400319475328460014980 5400319475328460014980 Yes Farzaneh Firozeh فرزانه فیروزه 5400319475328460014981 5400319475328460014981 No Rezvan Moniri رضوان منیری 5400319475328460014982 5400319475328460014982 No Mojtaba Sehat مجتبی صحت 5400319475328460014983 5400319475328460014983 No Zahra Zahedi Bidgoli زهرا زاهدی بیدگلی 5400319475328460014984 5400319475328460014984 No