fa بررسی بیان miR-21 و miR-221 در سرطان معده و ارتباط آن با ژنهای RECK وCDKN1B عمومى General پژوهشي اصیل Original Research سابقه و هدف: مطالعات اخیر بیانگر نقش کلیدی miR-221 و miR-21 در سرطان معده می باشند . هر چند دانش ما در مورد مکانیسم مولکولی عملکرد miR-221 و miR- 21 در سرطان بطور کلی و در سرطان معده بطور خاص محدود است. در این مطالعه دو microRNA بالقوه انکوژن (miR-221 و miR-21) انتخاب شده تا ارتباط سطوح بیان این microRNA ها و ژن های هدف آنها در بافت سالم و سرطانی معده مقایسه شوند. هدف این مطالعه بررسی ارتباط بیان این دو microRNA و ژن های هدف آنها در جمعیت ایرانی بود. روش بررسی: این مطالعه یک مطالعه موردی &ndash; شاهدی بود که بر روی تعداد 32 نمونه از بافت سرطانی معده و بافت مجاور آن انجام شد. نمونه ها از بیماران مراجعه کننده به انستیتو کانسر بیمارستان امام خمینی (ره) در فاصله سال های 1388 تا 1391 جمع آوری گردید. RNA تام با استفاده از محلول ترایزول و بر اساس دستورالعمل شر کت استخراج شد. cDNA برای mRNAو microRNA ساخته شد و سطوح بیان این ژن ها با qr-TPCR اندازه گیری شد. 18s rRNA و 5s rRNAبه عنوان کنترل داخلی استفاده شد. برای تحلیل میزان بیان ژن ها در نمونه های توموری نسبت به نمونه های سالم از آزمون paired t-test استفاده گردید و برای تعیین ارتباط بین سطح بیان miR-21 و miR-221، آزمون ضریب همبستگی پیرسون (Pearson) بکار گرفته شد. یافته ها: در میزان بیان miR-221 و miR-21 به صورت معنی داری در بافت سرطانی درمقایسه با بافت سالم مجاورش افزایش مشاهده شد. در نمونه سرطانی میانگین بیان miR-21 برابر با 07/1&plusmn; 18/4) 001/0(P < و میانگین بیان miR-221 برابر با 07/2 &plusmn; 75/5 بود ) 001/0(P < نتایج نشان داد که ارتباط معنی داری بین افزایش بیان 21- miRو کاهش بیان RECK (01/0 p= و 42/0- r=) و همچنین افزایش بیان 221- miRو کاهش بیان CDKN1B وجود دارد (008/0 p= و 46/0- r=) . نتیجه گیری: این مطالعه نشان داد که بیان 221 miR- و 21 - miR در بافت سرطانی معده افزایش می یابد و بین افزایش 21-miR و کاهش بیان RECK و همچنین افزایش بیان 221- miR و کاهش بیان CDKN1B رابطه معنی دار وجود دارد. احتمالا این دو microRNA می توانند به عنوان بیو مارکر در سرطان معده استفاده شوند. کلمات کلیدی:miR-21 ،miR-221 ،Realtime PCR ،SYBERGreen، سرطان معده وصول مقاله:2/9/93 اصلاحیه نهایی:11/11/93 پذیرش:14/11/93 Background and Aim: Recent studies on expression patterns of miR-21 and miR- 221 genes in gastric cancer suggest their key role in tumorigenesis. However, their molecular mechanism in cancer and especially gastric cancer has not been well understood. In this study, we aimed to investigate the association of these two micro RNAs expression and their target genes in normal and gastric carcinoma tissues. Methods: Thirty two gastric cancer tissues and its adjacent non-tumorous tissues were collected from patients referred to the cancer institute of Imam Khomeini hospital during 2008-2011. Total RNA was isolated and then cDNAs for microRNAs and mRNA were synthesized. The expression levels of miR-21 and miR-221 were detected by quantitative Real time RT- PCR using a 5s rRNA and 18s rRNA as the internal reference genes. Results: miR-21 and miR-221 expression were significantly up-regulated in cancerous samples compared to its adjacent non-tumorous tissue. The mean expression of miR-21 in the tumor sample was 4.18&plusmn; 1.07 (P <0.001) and the mean expression of miR-221 was 5.75&plusmn; 2.07 (P <0.001). The expression levels of miR-21 and miR-221 were negatively correlated with the expression levels of RECK and CDKN1B/p27 respectively. Conclusion: This study showed the expression of miR-21 and miR-221 increased in gastric cancer. There was a significant inverse correlation between increased expression of miR-21 and decreased expression of RECK, as well as between increased expression of miR-221 and decreased expression of CDKN1B. As a result, mi R-21 and miR-221 can be suggested two biomarkers in gastric cancer. Keyword: miR-21, miR-221, Real time RT-PCR, SYBR Green. Received: Nov 23, 2014 Accepted: Feb 3, 2015 miR-21 ,miR-221 ,Realtime PCR ,SYBERGreen, سرطان معده miR-21, miR-221, Real time RT-PCR, SYBR Green. 58 68 http://sjku.muk.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-25-7&slc_lang=fa&sid=1 Hossein Effatpanah حسین عفت پناه 5400319475328460018744 5400319475328460018744 No Research Center for Molecular Medicine, Hamadan University of Medical Sciences, Hamadan, Iran. مرکز تحقیقات پزشکی مولکولی، گروه پزشکی مولکولی و ژنتیک، دانشگاه علوم پزشکی همدان، همدان، ایران Reza Yadegarazari رضا یادگار آذری 5400319475328460018745 5400319475328460018745 No Research Center for Molecular Medicine, Department of Genetics and Molecular Medicine, Hamadan University of Medical Sciences, Hamadan, Iran. مرکز تحقیقات پزشکی مولکولی، گروه پزشکی مولکولی و ژنتیک، دانشگاه علوم پزشکی همدان، همدان، ایران Manochehr Karami منوچهر کرمی 5400319475328460018746 5400319475328460018746 No Social determinants of Health Research Center (SDHRC) and Department of Biostatistics & Epidemiology, School of Public Health, Hamadan University of Medical Sciences, Hamadan, Iran مرکز تحقیقات عوامل اجتماعی موثر بر سلامت، گروه آمار و اپیدمیولوژی، دانشگاه علوم پزشکی همدان، همدان، ایران Amir Majlesi امیر مجلسی 5400319475328460018747 5400319475328460018747 No Gastrointestinal Disease Department, Beheshti Hospital of Hamadan, Hamadan University of Medical Sciences, Hamadan, Iran. گروه بیماریهای گوارشی، بیمارستان شهید بهشتی دانشگاه علوم پزشکی همدان، همدان، ایران Noshin Shabab نوشین شباب 5400319475328460018748 5400319475328460018748 No Research Center for Molecular Medicine, Department of Genetics and Molecular Medicine, Hamadan University of Medical Sciences, Hamadan, Iran. مرکز تحقیقات پزشکی مولکولی، گروه پزشکی مولکولی و ژنتیک، دانشگاه علوم پزشکی همدان، همدان، ایران Masood Saidijam مسعود سعیدی جم sjam110@yahoo.com 5400319475328460018749 5400319475328460018749 Yes Research Center for Molecular Medicine, Department of Genetics and Molecular Medicine, Hamadan University of Medical Sciences, Hamadan, Iran. مرکز تحقیقات پزشکی مولکولی، گروه پزشکی مولکولی و ژنتیک، دانشگاه علوم پزشکی همدان ،همدان، ایران