fa تأثیرپیوند داخل وریدی سلول‌های بنیادی مشتق شده از چربی، بر نورون زایی هیپوکمپ پس از ضایعه 6- هیدروکسی دوپامین عمومى General پژوهشي اصیل Original Research زمینه و هدف: دوپامین آزاد شده از نورون‌های دوپامینرژیک بخش متراکم جسم سیاه (SNc)، نورون زایی در منطقه شکنج دندانه ای (DG) هیپوکمپ را تحت تاثیر قرار میدهد. در بیماری پارکینسون به دلیل آسیب نورون های دوپامینرژیک، نورون زایی در DG کاهش یافته و بدنبال آن با اختلال حافظه همراه خواهد بود. لذا پیوند سلول های بنیادی روش درمانی مناسبی برای جبران نورون های از دست رفته می باشد. روش بررسی: روش مطالعه در این تحقیق، تجربی- آزمایشگاهی بود که اثر پیوند داخل وریدی سلول های بنیادی مشتق شده از چربی بر نورون زایی هیپوکمپ بعد از ضایعه با 6- هیدروکسی دوپامین (مدل اختلال حافظه ی پارکینسون) مورد بررسی قرار گرفت. با تزریق دو طرفه 6-OHDA در SNc موش های صحرایی نر نژاد ویستار مدل های مورد نظر تهیه گردید، به طوری که گروه اول: گروه آسیب به میزان 6 میکروگرم نوروتوکسین در 2 میکرولیتر نرمال سالین به صورت دو طرفه به SNc تزریق گردید. گروه دوم: به عنوان گروه شم که نرمال سالین به جای نوروتوکسین و به همان میزان به صورت دو طرفه به SNc تزریق گردید. گروه سوم: حیوانات آسیب دیده که به آنها، پاساژ سوم سلول های ADSC که با‌روش ایمنوسیتوشیمی برای نشانگر CD90 مورد ارزیابی قرار گرفته بودند ( 1×106 سلول در 500 میکرو لیتر محیطMEM –α ) از طریق ورید دمی پیوند زده شده بود. گروه چهارم: حیوانات آسیب دیده که به آنها فقط 500 میکرو لیتر محیط کشت از طریق ورید دمی تزریق شد. پس از طی شدن مراحل درمان سرهای موش ها از بدن جدا شده و مغزها خارج گردیدند، پس از فیکساسیون با پارافرمالدئید 4%، آب گیری، تهیه بلوک های پارافینی، برش های 10 میکرونی گرفته شد. برش ها با کرزیل ویوله رنگ آمیزی شدند و شمارش سلول ها در مناطق DG،CA1 و CA3 هیپوکمپ صورت گرفت. داده ها با استفاده از آنالیز واریانس یک طرفه (ANOVA) و آزمون Tukey بررسی گردید. نتایج به صورت میانگین ± خطای معیار ارائه گردید، (05/0≥P ) معنی دار در نظر گرفته شد. یافته ها: کاهش معنا داری در تعداد نورون ها ی نواحی D‏G ، CA1 و CA3 در گروه های آسیب و محیط کشت نسبت به گروه شم مشاهده شد)001/0>P.( همچنین تعداد نورون ها در همین نواحی در گروه سلول افزایش معناداری را نسبت به گروه های محیط کشت و آسیب نشان داد (001/0>P). نتیجه گیری: پیوند سلول های ADSC از طریق ورید دمی اثر نوروپروتکتیو بر هیپوکمپ داشته و از مرگ نورون ها در اثر القاء 6-OHDA جلوگیری می کند، به طوری که سلول درمانی می تواند روش مناسبی در بهبود اختلال حافظه ی پارکینسون باشد. واژگان کلیدی: سلول بنیادی مشتق شده از چربی، بیماری پارکینسون، هیپوکمپ، حافظه، نورون زایی. وصول مقاله:3/5/92 اصلاحیه نهایی:6/3/93 پذیرش:7/3/93 ABSTRACT Background and Aim: Released dopamine from dopaminergic neurons in the substantia nigra pars compacta affects dentate gyrus (DG) neurogenesis in the hippocampus (HPC). Damage to dopaminergic neurons in Parkinson's disease (PD) causes decreased neurogenesis in DG which results in memory impairment. Materials and Methods: This was an experimental laboratory study. We assessed the effect of intravenous transplantation of adipose-derived stem cells (ADSCs) on hippocampal neurogenesis after inducing injury by 6-OHDA (memory disability model of PD).We performed bilateral injections of 6-OHDA into substantia nigra (SNc) of male Wistar rats. First group of the rats received bilateral injections of 6-OHDA (6 µg) dissolved in 2µl saline. Second group received saline injections instead of neurotoxin (sham group). In the third group we transplanted the 3rd passage of ADSC cells which had been assessed for CD90 immunostaining (1×106 in 500 μl medium), via tail vein. The 4th group included injured rats which received an injection of the fluid of the culture media (500 µl) through tail vein. After treatment, rats were sacrificed. The brains of the rats were removed, fixed with 4% paraformaldehyde, dehydrated, embedded in paraffin and cut into 10μm thick slices. We stained the sections with cresyl violet and determined the density of neurons in DG, CA1, CA3. Result: Statistical analysis was performed by one-way ANOVA and Tukey test. P≤ 0 .05 was considered significant. Neuron density in DG, CA1, CA3 showed significant decrease in the injured and medium treated groups compared to the sham group (P<0.00). All so we found a significant increase in neuron density in these regions in the cell group in comparison to the medium treated and injured groups (p<0.000). Conclusion: Intravenous injection of ADSCs protected hippocampal neurons from further damage in response to 6-OHDA.Therfore cell therapy can be a suitable method for the improvement of memory impairment in the patients with Parkinson's disease. Key words: Adipose-derived stem cells, Parkinson's disease, Hippocampus, memory, Neurogenesis. Received: Jul 25, 2013 Accepted: May 28, 2014 سلول بنیادی مشتق شده از چربی, بیماری پارکینسون, هیپوکمپ, حافظه, نورون زایی. Adipose-derived stem cells, Parkinson\'s disease, Hippocampus, memory, Neurogenesis. 36 51 http://sjku.muk.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-458&slc_lang=fa&sid=1 Seyedeh Narjes Hashemi rad سیده نرجس هاشمی راد 540031947532846006348 540031947532846006348 No Damghan University دانشگاه دامغان Maryam Haji Ghasem Kashani مریم حاجی قاسم کاشانی 540031947532846006349 540031947532846006349 No Damghan University دانشگاه دامغان Shima Ababzadeh شیما آب آب زاده 540031947532846006350 540031947532846006350 No Iran University of Medical Sciences دانشگاه علوم پزشکی ایران Mohammad Taghi Ghorbanian محمد تقی قربانیان kashani @du.ac.ir 540031947532846006351 540031947532846006351 Yes Damghan University دانشگاه دامغان