|
بیان و تخلیص پروتئین نوترکیب انتهای کربوکسیل نوروتوکسین بوتولینوم A در باکتری اشریشیاکلی به عنوان کاندیدای تولید واکسن بوتولیسم
|
سید صفا علی فاطمی1   ، خیرا. . یاری 2، محمود تولائی3 ، دانیال کهریزی4 |
1- پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک و زیست فناوری
2- دانشگاه علوم پزشکی کرمانشاه ، khirollah.yari@yahoo.com
3- دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله (عج)
4- دانشگاه رازی |
|
|
چکیده: (14084 مشاهده) |
| چکیده
زمینه و هدف: بوتولیسم بیماری کشنده‌ای است که توسط نوروتوکسین یکی از هفت نوع کلستریدیوم بوتولینوم ایجاد می‌شود. بخش کربوکسیل زنجیره سنگین نوروتوکسین کلستریدیوم بوتولینوم تیپ A(BoNT/A-Hc)، از قابلیت بالایی در تحریک سیستم ایمنی برخوردار است که امروزه برای تولید واکسن نوترکیب علیه بوتولیسم به کار می‌رود. هدف از این پژوهش بیان و تخلیص فرم محلول این بخش از نوروتوکسین در باکتری اشریشیاکلی نوترکیب می‌باشد.
روش بررسی: در این تحقیق وکتور pET28aحاوی ژن BoNT/A-Hc به باکتری اشریشیاکلی نوترکیب انتقال داده شد. در ادامه، بهترین کلنی از سویه نوترکیب بر اساس سه شاخصه مهم میزان رشد باکتری، بیان پروتئین و پایداری پلاسمید انتخاب شد. سپس بیان محصول در محیط کشت LB و M9 اصلاح شده بررسی، و پروتئین مورد نظر با ستون کروماتوگرافی رزینی تخلیص گردید.
یافته‌ها: در شرایط بهینه شده کشت باکتری در مقیاس فلاسک، 52 میلی‌گرم پروتئین محلول BoNT/A-Hcبه ازای یک لیتر محیط کشت حاصل شد.
نتیجه‌گیری: براساس یافته‌های این تحقیق می‌توان نتیجه‌گیری کرد که انتخاب سویه مناسب براساس شاخصه‌های مهم رشد باکتری، بیان پروتئین نوترکیب و پایداری پلاسمید در افزایش بازدهی تولید پروتئین نوترکیب مؤثر است.
کلید واژه‌ها: بیان پروتئین، اشریشیاکلی، کلستریدیوم بوتولینوم، بوتولیسم
وصول مقاله: 26/11/89 اصلاحیه نهایی: 21/2/90 پذیرش مقاله: 28/2/90 |
|
| واژه‌های کلیدی: بیان پروتئین، اشریشیاکلی، کلستریدیوم بوتولینوم، بوتولیسم |
|
|
متن کامل [PDF 4588 kb]
(3031 دریافت)
|
نوع مطالعه: پژوهشي اصیل |
موضوع مقاله:
عمومى
دریافت: 1390/5/11 | انتشار: 1390/5/24
|
|
|
|
|
|
