بررسی منشاء ژنتیک شیگاتوکسین در اشریشیا کلی انتروهموراژیک
|
سعید سپهری سرشت ، تقی زهرایی صالحی ، مرتضی ستاری 1، حسن تاجبخش ، محمد مهدی اصلانی |
1- ، sattarim@modares.ac.ir |
|
چکیده: (17463 مشاهده) |
زمینه و هدف: انتروهموراژیک اشریشیا کلی (EHEC) یکیازمهمترینعواملبیماریزایخطرناکوحتیبامرگومیربالاهنگاماپیدمیهایناشیازمصرفغذاهایآلودهمعرفیشدهاست.تولیدسیتوتوکسینهاییموسومبهسمومشیگا (Shiga toxin) ازویژگیهایبارزاینگروهازباکتریهاست.بررسیمنشاءژنتیکدرکنترلانتشارتولیدتوکسیندربینسویههایمختلفاشریشیاکلیاهمیتدارد. همچنین برای تولید مقادیر زیاد توکسین جهت اثرات ضد سرطانی آن ناگزیر از شناسایی منشاء ژنتیک توکسین هستیم. روش بررسی:تعداد400نمونهمدفوعازگاوهاوگوسالههایسهگاوداریدراستانتهراندرونلولههایاستریلحاویسرمفیزیولوژیاستریلگرفتهشد. استخراج Total DNA ایزولههایاشریشیاکلی انجام گرفت و بر روی آن PCR جهت جداسازی اولیه ایزولههای شیگاتوکسیژن انجام شد. جهتاستخراجفاژهایلیزوژنازسلولباکتری القاء فاژ با استفاده از سیپروفلوکساسین انجام گرفت و سپس با روش فیلتراسیون و هضم آنزیمی، فاژ تخلیص شد. روی فاژ تخلیص شده مجدداً PCR انجام شد تا وجود ژن شیگاتوکسین روی ژنوم فاژ اثبات شود. یافتهها: مشخصشدکهاز34ایزولهشیگاتوکسیژنیک،24ایزوله(5/70%)شیگاتوکسین1،8ایزوله(5/23%)شیگاتوکسین2و2ایزوله(6%)هردونوعشیگاتوکسینراتولیدمیکردند. همچنینفراوانیحضورژنرمزکنندهشیگاتوکسینرویژنومفاژبررسیومشخصشدکهاز34ایزولهدامیموردمطالعه،26ایزوله(5/76%) واجدفاژلیزوژنرمزکنندهشیگاتوکسینهستند. نتیجهگیری: ثابتشدهکهشیگاتوکسینمیتواندتوسطفاژ،کروموزومیاپلاسمیدکدشود.درصورتیکه فاژدرسطحباکتریدارایگیرندهباشد،میتواندواردپیکرباکتریشود.بنابرایندرصورتیکهژنرمزکنندهشیگاتوکسینبررویفاژقرارگرفتهباشد،ممکناستدربینسویههایمختلفیکباکترییادربینباکتریهایمختلفپخششود.بنابراینبررسیمنشاءژنتیکدرکنترلانتشارتولیدتوکسیندربینسویههایمختلفاشریشیاکلیاهمیتدارد.ازسویدیگرشیگاتوکسیندارایاثراتضدسرطانیمیباشد.بنابرایناگرهدف،استفاده شیگاتوکسینبهعنوانیکدارویضدسرطانباشد،مطلوبآناستکهبتواناینتوکسینرابهمقدارزیادتولیدنمودوناگزیرازشناساییمنشاءژنتیکآنهستیم.
وصول مقاله: 12/4/87 اصلاح نهایی: 1/5/87 پذیرش مقاله: 14/5/87 |
|
واژههای کلیدی: اشریشیا کلی، PCR، شیگاتوکسین، فاژ |
|
متن کامل [PDF 223 kb]
(2871 دریافت)
|
نوع مطالعه: پژوهشي اصیل |
موضوع مقاله:
عمومى دریافت: 1388/1/22 | انتشار: 1387/9/25
|
|
|
|