تاثیر ویتامین ث بر القاء کلونیزایی سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی گوسفند در محیط آزمایشگاه
|
محیا بهرامی1 ، پیمان رحیمی فیلی 2، علی اصغر مقدم3 |
1- دانشکده دامپزشکی، دانشگاه رازی، کرمانشاه، ایران 2- گروه علوم درمانگاهی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه رازی، کرمانشاه، ایران ، drp.rahimi@gmail.com 3- گروه علوم درمانگاهی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه رازی، کرمانشاه، ایران |
|
چکیده: (3697 مشاهده) |
زمینه و هدف: تکنولوژی استفاده از سلولهای بنیادی به دلیل عدم وجود یک سیستم کشت ایدهآل برای رشد و تکثیر این سلولها محدود شده است. هدف از این مطالعه بررسی اثر غلظتهای مختلف ویتامین ث بر القاء کلونیزایی این سلولها در محیط کشت است.
روش بررسی: سلولهای اسپرماتوگونی بیضه بره نابالغ طی دو مرحله هضم آنزیمی جدا و به روش حذف تمایزی خالصسازی شدند. این سلولها به مدت 10 روز به چهار روش تیمار شدند: گروه شاهد شامل کشت ساده سلولهای اسپرماتوگونی در محیط DMEM حاوی 1 درصد آنتیبیوتیک و 5 درصد FBS و تیمارهای 1، 2 و 3 شامل محیط بالا و به ترتیب 20، 40 و 60 میکروگرم بر میلیلیتر ویتامین ث بود. تعویض محیط کشت هر 3 روز انجام شد و تعداد و قطر کلونیهای تشکیل شده در روزهای 4، 7 و 10 پس از کشت به وسیله میکروسکوپ معکوس بررسی گردید. شناسایی سلولها با رنگآمیزی ایمنوسیتوشیمی علیه PGP9.5 انجام شد. یافتههای حاصل از پنج بار تکرار با استفاده از نرم افزار R و آزمون آماری آنالیز واریانس مورد بررسی قرار گرفت و 05/0>p بعنوان سطح معنیداری تعیین گردید.
یافته ها: مساحت کلونیهای اسپرماتوگونی در روز 7 در تیمار 2 (41/0) اختلاف معنیداری با تیمار 3 (08/0) داشت (05/0P<). همچنین مساحت کلونیها در روز 10 کشت در تیمار 2 با دیگر گروهها اختلاف معنیدار داشت (05/0P<).
نتیجه گیری: نتایج حاصل از این مطالعه نشان میدهد که ویتامین ث در دوز 40 میکروگرم بر میلیلیتر دارای تاثیر مثبت افزایشی بر مساحت کلونیهای اسپرماتوگونی است ، اما روی تعداد سلولهای اسپرماتوگونی بی تاثیر است.
کلمات کلیدی: سلول بنیادی اسپرماتوگونی، ویتامین ث، کشت سلول
وصول مقاله :20/9/95 اصلاحیه نهایی:23/1/96 پذیرش:21/5/96 |
|
واژههای کلیدی: سلول بنیادی اسپرماتوگونی، ویتامین ث، کشت سلول |
|
متن کامل [PDF 279 kb]
(1245 دریافت)
|
نوع مطالعه: پژوهشي اصیل |
موضوع مقاله:
عمومى دریافت: 1396/8/29 | پذیرش: 1396/8/29 | انتشار: 1396/8/29
|
|
|
|